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Cardiolipin-protein interactions in the phosphate binding activity of a proteolipid from yeast mitochondria

1982; Elsevier BV; Volume: 64; Issue: 10 Linguagem: Francês

10.1016/s0300-9084(82)80350-7

1638-6183

Geneviève ARSELIN de CHATEAUBODEAU, Martine Guérin,

Photosynthetic Processes and Mechanisms

Un complexe protéolipide-lipide capable de fixer le phosphate a été isolé des mitochondries de levure. Lors des différentes purifications, la protéine étant toujours associée à des cardiolipides, on a étudié quel était le rôle de ce phospholipide dans l'activité de fixation du phosphate. La délipidation contrôlée a été obtenue en faisant agir soit la phospholipase A2 de pancréas de porc, soit la phospholipase A2 de venin de serpent, soit la phospholipase C de Bacillus cereus. La phospholipase A2 de venin est sans action sur l'activité du protéolipide alors qu'après action de la phospholipase A2 de pancréas de porc, l'activité du protéolipide est inhibée de 70 p. cent. La phospholipase C provoque 80 p. cent d'inhibition, alors que seule une fraction des cardiolipides est dégradée. Par chromatographie sur couche mince dans un système séquentiel de solvants on a pu séparer deux sous-espèces de cardiolipides dont l'une est préférentiellement hydrolysée par la phospholipase C, ce qui provoque l'inhibition de l'activité du protéolipide. L'inhibition de l'activité du protéolipide a été obtenue également par l'action du calcium, qui est complexé par le cardiolipide, avec une stoechiométrie 1-1. Cet effet du calcium pourrait être dû à une modification de l'association cardiolipideprotéine. A proteolipid able to bind phosphate has been isolated from yeast mitochondria. During the purification the active protein was always associated with cardiolipin. The cardiolipin requirement for the phosphate binding activity of this proteolipid has been studied using controlled lipid depletion with two phospholipases A2 and with phospholipase C. Only phospholipase A2 from pig pancreas, that deacylated cardiolipin, promoted inhibition of the proteolipid activity (but never more than 70 per cent). Phospholipase A2 from snake venom did not inhibit the binding activity of the proteolipid. Using thin layer chromatography with two sequential solvents it was possible to separate two cardiolipin subspecies ; one of them was preferentially hydrolysed by phospholipase C of Bacillus cereus, leading to inhibition of the proteolipid activity. Ca2+ complexed to cardiolipin stoichiometrically (1-1) inhibited the proteolipid activity. This effect could be due to a conformational change in the cardiolipin-protein association.