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Specific probes efficiently distinguish root-knot nematode species signature sequences in the ribosomal intergenic spacer

1997; Brill; Volume: 20; Issue: 6 Linguagem: Francês

1164-5571

Daniel J. Petersen, C. Zijlstra, Jill A. Wishart, Vivian Blok, T. C. Vrain,

Entomopathogenic Microorganisms in Pest Control

Ont ete etablies des sondes moleculaires -destinees a identifier les especes de Meloidogyne- grâce a des differences specifiques dans l'espaceur intergenique (IGS) de l'ADN ribosomal. Les sequences de nucleotides de l'IGS ont ete obtenues en sequencant l'ADN amplifie par PCR. L'alignement des sequences de l'IGS de M. chitwoodi et M. fallax a revele plusieurs regions contenant des differences localisees. Des amorces PCR ont ete synthetisees qui ont donne des produits d'amplification specifiques lorsqu'utilisees avec des amorces non specifiques (conservees). Les produits d'amplification d'une seule reaction PCR utilisant cinq amorces, specifiques et non specifiques, ont pu etre separes par leur taille dans un gel d'agarose, procurant ainsi un test fiable et precis ne necessitant pas de restriction enzymatique. L'amplification de l'ADN d'un nematode juvenile ou d'un oeuf par PCR multiplex a permis d'identifier M. chitwoodi et M. fallax et de les separer de M. hapla, M. incognita, M. javanica, M. arenaria et M. mayaguensis.