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Estudo comparativo com diversos fixadores para aplicação em microscopia eletrônica de transmissão

2004; Volume: 63; Issue: 2 Linguagem: Português

10.53393/rial.2004.63.34870

2176-3844

Daniel S. Abrahão, Ana Rita Toledo Piza, Marilena dos Anjos Martins, Jacinto da Costa Silva Neto, Elaine C. J. Ferreira, Ludmila Nakamura Rapado, Tânia Matiko Hosoda, Raquel C. Silva, A.C.G.S. Azzuz, Noemi Nosomi Taniwaki, Maria de Fátima Costa Pires,

Carcinogens and Genotoxicity Assessment

Um estudo comparativo sobre a ação de diversos fixadores utilizados em microscopia eletrônica de transmissão (MET) e microscopia de luz (ML) foi realizado, a fim de analisar a preservação de estruturas celulares ao microscópio eletrônico de transmissão (MET). Fragmentos de fígado de camundongo foram fixados em 5 diferentes fixadores: o fixador de Karnovsky, glutaraldeído e paraformaldeído utilizados no processamento para MET e o formaldeído comercial e líquido de Bouin utilizados no processamento para ML. Após a fixação, os fragmentos foram pós-fixados com tetróxido de ósmio e contrastastados com acetato de uranila. A seguir foram desidratados e incluídos em resina Epon. Os cortes ultrafinos mostraram que os fragmentos fixados com Karnovsky e glutaraldeído apresentaram melhor preservação das estruturas celulares e menor extração. O paraformaldeído produziu alguns artefatos de má fixação e extração pelo fato de formar menos ligações cruzadas que o glutaraldeído. Os fixadores formaldeído comercial e o líquido de Bouin utilizados em microscopia de luz mostraram que não são adequados ao uso em MET, pois são considerados fixadores coagulantes e produzem extensa extração dos componentes celulares. Comparando-se as imagens obtidas com os fixadores utilizados, o fixador de Karnovsky e o glutaraldeído mostraram melhor preservação e maior similaridade na morfologia.