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Vergleichende Untersuchungen zur Wirksamkeit des Paramunitätsinducers PIND-AVI, des Mitogens PHA-P und von Rhinopneumonitisvirus auf die peripheren Lymphozyten des Pferdes

2010; Wiley; Volume: 28; Issue: 6 Linguagem: Francês

10.1111/j.1439-0450.1981.tb01763.x

0931-2021

P Thein, Hannes Hechler, A. Mayr,

Immune Cell Function and Interaction

Zusammenfassung Lymphozyten aus dem strömenden Blut von Pferden wurden über Dichtegradienten isoliert, im Panning-Verfahren in T- und B-Zellen getrennt und ihre Reaktivität gegenüber Phytohaemagglutinin, Paramunitätsinducer PIND-AVI und Rhinopneumonitisvirus (EHV1) geprüft. Die Untersuchungen wurden im E-Rosettentest und im Lymphozytentransformationstest (Mikro-methode) sowohl an PIND-AVI-paramunisierten als auch an nicht paramunisierten Pferden durchgeführt. Vergleichend dazu wurde in Intracutantests mit PHA, PIND-AVI, vermehrungsfähigem und AEI-inaktiviertem EHV1 die nichtantigene und die antigenspezifische T-Zellreaktivität getestet sowie der Einfluß einer Paramunisierung auf Ausprägung und Verlauf dieser Reaktion untersucht. Signifikante Lymphozytentransformationen (Stimulationsindex > 2) wurden gegenüber PHA-P, dem Paramunitätsinducer PIND-AVI und EHV1 erzielt. Isolierte T-Zellen reagierten hierbei stärker als die jeweils mituntersuchte Lymphozytengesamtfraktion. Die höchsten Stimulationsindizes gegenüber PHA-P betrugen 171,99, gegenüber PIND-AVI 10,92, gegenüber vermehrungsfähigem EHV1 10,85 und gegenüber inaktiviertem EHV1 20,79. Paramunisierung mit PIND-AVI führte zu einer Aktivierung der T-Zellen, was sich in einer Erhöhung der Stimulationsindizes ausdrückte. Die gleiche Beobachtung wurde im E-Rosettentest gemacht, der als T-zellspezifisch gilt. Innerhalb dieser Untersuchungen wurde nachgewiesen, daß Pferde über unterschiedliche Quantitäten reaktiver T-Zellen im peripheren Blut verfügen und somit individuell im entsprechenden in vitro-Test reagieren. Langzeituntersuchungen über ein Jahr an bestimmten Pferden ergaben, daß es in einem Rhythmus von etwa 8 Wochen zur Reduktion und Wiederausschleusung reaktiver, peripherer T-Zellen zu kommen scheint. In den Intracutantests reagierten die untersuchten Pferde mit Hautreaktionen vom Typ der verzögerten Allergie gegenüber PHA, PIND-AVI und EHV1. Auch hier führte eine vorangegangene Paramunisierung zu einer Verstärkung der Hautreaktion. Zwischen humoralen, virusneutralisierenden EHV1-Antikörpern und Auftreten bzw. Ausprägung der Hautreaktion bestand keine Korrelation. Summary Comparative studies on the activity of paramunity inducer PIND-AVI, mitogen PHA-P and rhinopneumonitis virus on the peripheral leucocytes of the horse Lymphocytes were isolated by density gradient from the circulating blood of horses, separated into T- and B-cells by the Panning method and their reaction to phytohaemagglutinin, paramunityinducer PIND-AVI and rhinopneumonitisvirus (EHV1) was tested. The studies were carried out using the E-rosette test and the lymphocyte transformation test (micromethod) on both PIND-AVI paramunized horses and on horses not so treated. In skin tests with PHA, PIND-AVI, living and AEI-inactivated EHV1 the antigenic and non-antigenic T-cell activity was tested, the effect of paramunization on the extent and development of this reaction was also studied. Significant lymphocyte transformation (stim. index > 2) was achieved against PHA-P, the paramunity inducer PIND-AVI and EHV1. Isolated T-cells reacted here more markedly than the total lymphocyte fraction studied at the same time. The highest stimulation indices against PHA-P were 171.99, against PIND-AVI 10.92, living EHV1 10.95, inactivated EHV1 20.79. Paramunization with PIND-AVI led to activation of T-cells which resulted in increasing stimulation indices. The same observation was made in the E-rosette test which is considered T-cell-specific. In these studies it was shown that horses yield varying amounts of reactive T-cells from their peripheral blood and react individually in the respective in vitro test. Long termed studies over a year on particular horses showed evidence of an 8-week rhythm of reduction and restoration of reactive peripheral T-cells. In the skin tests the horses gave skin reactions of the delayed type against PHA, PIND-AVI and EHV1. Here also previous paramunization resulted in a more severe skin reaction. Between humoral, virusneutralizing EHV1-anti-bodies and the appearance or extent of the skin reaction there was no correlation. Résumé Recherches ont été effectueés de l'inducteur paramunitaire PIND-AVI et d'phytohémagglutinin et d'un virus de rhinopneumonie (EHV1) sur lymphocytes de chevaux Des lymphocytes ont été isolés sur gradientes en couches à partir du sang circulant de chevaux, séparés en cellules T et B par procédé «Panning» et on a examiné leur réaction vis-à-vis d'une phytohémagglutinine, de l'inducteur parammunitaire PIND-AVI et d'un virus de rhinopneumonie (EHV1). Les recherches ont été effectuées au moyen du test des E-rosettes et du test de transformation des lymphocytes (microméthode) aussi bien chez des chevaux parammunisés au PIND-AVI que non parammunisés. On a testé par comparison aussi bien l'activité cellulaire T non antigénique et spécifiquement antigénique dans des tests intracutanés avec PHA, PIND-AVI, EHV1 multiplicable et inactivé par AEI que l'influence d'une paramunisation sur l'étendue et l'évolution de cette réaction. Des transformations lymphocytaires significatives (index de stimulation > 2) ont été obtenues vis-à-vis de PHA-P, de l'inducteur parammunitaire PIND-AVI et de EHV1. Les cellules T isolées ont réagi plus fortement que la fraction totale des lymphocytes examinée en même temps selon les cas. Les indices de stimulation les plus élevés furent les suivants: 171,99 contre PHA-P, 10,92 contre PIND-AVI, 10,85 contre EHV1 multiplicable et 20,79 contre EHV1 inactivé. Une parammunisation avec PIND-AVI a provoqué une activation des cellules T qui s'est manifestée par une augmentation de l'indice de stimulation. La même observation a été faite dans le test des rosettes qui passe pour spécifique de la cellule T. On a établi grâce à ces recherches que les chevaux disposent de différentes quantités de cellules T réactives dans le sang périphérique et qu'il réagissent individuellement et en correspondance dans un test in vitro. Des recherches de longue durée sur une année avec certains chevaux ont montré qu'il se produit durant un rythme d'environ 8 semaines une réduction et un rétablissement des cellules T réactives et périphériques. Les chevaux examinés ont manifesté dans les tests intracutanés des réactions cutanées de type allergique retardé vis-à-vis de PHA, PIND-AVI et EHV1. Une parammunisation préalable a là aussi également conduit à une intensification de la réaction cutanée. Il d'y a pas eu de corrélation entre des anticorps humoraux, neutralisant le virus EHV1 et l'apparition, respectivement l'étendue de la réaction cutanée. Resumen Investigaciones comparativas de la eficacia del inductor de la paramunidad PIND AVI, de PHA-P y del virus de la rinopneumonitis para los linfocitos periféricos del caballo Se aislaron los linfocitos de la sangre circulante de caballos sobre gradientes de densidades, se separaron según el procedimiento de lavado en células T y B, examinándose su reactividad frente a la fitohemaglutinina, al inductor de la paramunidad PIND-AVI y el virus de la rinoneumonitis (EHV1). Las experiencias se llevaron a cabo con la prueba de rosetas E y con la prueba de transformación de los linfocitos (micrométodo) tanto en caballos paramunizados con PIND-AVI como en no paramunizados. De forma comparativa a esto, se estudió en la prueba intracutánea con PHA, PIND-AVI, EHV1 multiplicable e inactivado con AEI la reactividad celular T no antígena y la específica de antígeno, así como el influjo de la paramunización sobre de la estampación y el curso de esta reacción. Se consiguieron transformaciones de linfocitos significantes (índice de estimulación > 2) frente a PHA-P, el inductor de paramunidad PIND-AVI y EHV1. Las células T aisladas reaccionaban aquí con intensidad mayor que la fracción total de linfocitos estudiados cada vez de forma simultánea. Los índices máximos de estimulación frente a PHA-P eran del orden de 171,99, mientras que frente a PIND-AVI 10,92, frente al EHV1 multiplicable 10,85 y frente al EHV1 inactivo 20, 79. La paramunización con PIND-AVI conducía a la activación de las células T, lo cual se expresaba en un aumento de los índices de estimulación. La misma observación se hizo en la prueba de rosetas E, la cual se considera como específica de las células T. A lo largo de estas investigaciones se demostró que los caballos disponen de cantidades diferentes de células T reactivas en la sangre periférica, reaccionando por lo tanto de manera individual en la prueba in vitro correspondiente. Los estudios a plazo largo durante más de un año en ciertos caballos tuvieron por resultado el que en un ritmo de unas 8 semanas se produce la reducción y salida de las células T reactivas periféricas. En las pruebas intracutáneas reaccionaban los caballos examinados con reacciones cutáneas del tipo de alergia retardada frente a PHA, PIND-AVI y EHV1. También aquí conducía la paramunización previa a un refuerzo de la reacción cutánea. No existía relación alguna entre los anticuerpos EHV1 humorales neutralizantes de virus y la aparición resp. la estampación de la reacción cutánea.