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Isolation and Characterisation of Equine IgE

2010; Wiley; Volume: 28; Issue: 5 Linguagem: Inglês

10.1111/j.1439-0450.1981.tb01930.x

0931-2021

Mark Suter, H. Fey,

Allergic Rhinitis and Sensitization

Summary Homocytotropic antibodies capable of sensitizing equine skin were demonstrated in equine serum three weeks following antigenic stimulation with o-DNCP-BSA. The heat labile antibody had a molecular weight of about 200,000 daltons. Positive Prausnitz-Küstner reactions demonstrated that homocytotropic antibodies persist in equine skin for at least ten days. This reaginic immunoglobulin class was separated from appropriate antisera by ammonium sulphate precipitation and purified by chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration on Sephacryl S 200 columns. Ten μg. protein of the final preparation was capable of eliciting a positive PCA. In immunodiffusion tests the immunoglobulin class associated with the skin-sensitizing activity did not cross-react with antisera against the known equine immunoglobulin classes. The results indicate that homocytotropic antibody activity in the equine is associated with an immunoglobulin class analogous to human IgE. Zusammenfassung Isolierung und Charakterisierung von Pferde-IgE Drei Wochen nach der Immunisierung mit o-DNCP-BSA konnten beim Pferd homocytotrope Antikörper nachgewiesen werden. Dieser hitzelabile Antikörper wies ein Molekulargewicht von 200 000 Daltons auf. Er persistierte wenigstens 10 Tage in Pferdehaut, was anhand von positiven Prausnitz-Küstner-Reaktionen gezeigt werden konnte. Seren von immunisierten Pferden wurden mit Ammoniumsulfat ausgesalzen und der reagine Antikörper mittels Anionenaustausch an DEAE-Cellulose und Gelfiltration an Sephacryl S 200 weiter gereinigt. Zehn μg der best gereinigten Fraktion waren ausreichend, um einen positiven PCA zu produzieren. Kaninchen-Antiseren gegen diese Fraktion zeigten im Ouchterlonytest keine Kreuzreaktion gegen die bekannten Pferde-Immunoglobulinklassen. Die Resultate lassen den Schluß zu, daß das Pferd einen cytophilen Antikörper besitzt, der ähnliche Charakteristika wie humanes IgE aufweist. Résumé Isolement et caractérisation des IgE du cheval Des anticorps homocytotropes ont été mis en évidence trois semaines après l'immunisation avec o-DNCP-BSA chez le cheval. Cet anticorps thermolabile avait un poids moléculaire de 200 000 Daltons. Il persista au minimum 10 jours dans la peau, ce qui a pu être montré avec des réactions de Prausnitz-Küstner positives. Les sérums des chevaux immunisés furent traités au sulfate d'ammonium et les anticorps purifiés sur DEAE-Cellulose et en filtration sur gel à Sephacryl S 200. Dix μg de la fraction la mieux purifiée ont été suffisants pour produire un PCA positif. Des antisérums de lapin contre cette fraction n'ont montré aucune réaction croisée avec les classes connues d'immunoglobulines du cheval dans le test d'Ouchterlony. Les résultats permettent de conclure que le cheval possède un anticorps cytophile qui présente les mêmes caractéristiques que l'IgE humaine. Resumen Aislamiento y caracterización de la IgE del caballo Tres semanas tras la inmunización con o-DNCP-BSA se pudieron poner en evidencia en el caballo anticuerpos homocitotropos. Este anticuerpo termolábil tenía un peso molecular de 200.000 daltones. Persistía al menos 10 dias en la piel de caballo, lo cual se pudo demostrar con ayuda de reacciones Prausnitz-Küstner positivas. Los sueros sanguíneos de caballos inmunizados se precipitaron con sulfato amónico y el anticuerpo reagínico se siguió purificando mediante intercambio de aniones a celulosa DEAE y filtración por gelosa en sephacryl S 200. Diez μg de la fracción purificada mejor eran suficientes para producir una anafilaxia cutánea pasiva (ACP) positiva. Los antisueros de conejo frente a esta fracción no mostraban ninguna reacción cruzada en la prueba de Ouchterlony con las clases conocidas de inmunoglobulinas de caballo. Los resultados permiten llegar a la conclusión de que el caballo posee un anticuerpo citófilo, el cual tiene características semejantes a la IgE humana.