Portal de Periódicos da CAPES

A Simple and Inexpensive Method for Detection of BLV Infected Cattle Based on a Modified ELISA Principle

2010; Wiley; Volume: 29; Issue: 7 Linguagem: Francês

10.1111/j.1439-0450.1982.tb01258.x

0931-2021

Č Altaner, Vladimír Zajac, J. Bán,

Herpesvirus Infections and Treatments

Summary A modified solid-phase enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies to bovine leukosis virus (BLV) is described, using special polystyrene sticks. A spherical mass at one end of the stick is coated with virus antigens. Antibodies to BLV bound to the stick are detected by anti-bovine IgG peroxidase conjugate. Visualization of the reaction is achieved by 3-amino-9-ethylcarbazole. The brown-red colour is insoluble and is fixed to the surface of the stick. Evaluation is done visually, or colorimetrically after the colour is dissolved in ethanol. Detection of bound antibodies can be achieved subsequently on the same stick by labelled protein A. The assay is simple and can be performed on a large scale without special instruments. The sensitivity of the test is the same as RIA or the BLV-VSV pseudotype neutralization test. The assay is suitable for large-scale bovine leukosis screening programmes but could be used for any system where the antibodies or antigens need to be detected. Zusammenfassung Eine billige und einfache Methode zur Erfassung BLV-infizierter Rinder durch ein abgewandeltes ELISA-Verfahren Eine modifizierte Festphasen-ELISA-Technik für den Nachweis von Rinderleukosevirus (BLV)-Antikörpern wird beschrieben. Diese Methode verwendet spezielle Polystyrol-Stäbchen. Am runden Kopf der Stäbchen sind die Virusantigene adsorbiert. Die an die Stäbchen gebundenen BLV-Antikörper werden mit Anti-Rind-IgG-Peroxidase-Konjugat nachgewiesen. Die Reaktion wird mit 3-Amino-9-Äthylkarbazol sichtbar gemacht. Die braun-rote Farbe ist unlöslich und an der Stäbchenoberfläche fixiert. Die Auswertung erfolgt visuell oder — nach Lösung der Farbe in Äthanol — kolorimetrisch. Der Nachweis der Antikörperbindung kann später mit markiertem Protein A am selben Stäbchen erfolgen. Der Test ist einfach und kann in großem Umfang routinemäßig ohne spezielle Instrumente durchgeführt werden. Die Empfindlichkeit des Tests entspricht derjenigen des RIA oder BLV-VSV-Pseudotypneutralisationstests. Der Test ist für routinemäßige Rinderleukose-Screening-Programme geeignet; aber er könnte auch für jedes andere System Verwendung finden, in dem Antikörper oder Antigene nachgewiesen werden sollen. Résumé Une méthode simple et bon marché pour la détection de bovin infectés par BLV par un procédé ELISA modifié Une technique ELISA modifiée pour la mise en évidence des anticorps du virus de la leucose bovine (BLV) est décrite. Cette méthode utilise des bâtonnets spéciaux en polystyrol. L'antigène viral est absorbé sur la tête ronde des bâtonnets. Les anticorps BLV liés aux bâtonnets sont révélés avec un conjugué à la peroxydase anti-IgG bovin. La réaction est rendue visible avec 3-amino-9-éthyle-carbazol. La couleur brun-rouge est insoluble et fixée à la surface des bâtonnets. L'interprétation se fait visuellement ou colorimétriquement après éclaircissement de la couleur dans de l'éthanol. La mise en évidence de la liaison des anticorps peut avoir lieu plus tard avec une protéine A marquée sur les mémes bâtonnets. Le test est simple et peut être effectué sans instrumentation spéciale en routine avec beaucoup de matériel. La sensibilité du test correspond à celle du RIA ou du test de pseudotype-neutralisation BLV-VSV. Le test est adéquat pour un programme en screening d'un diagnostic de leucose bovine pour la routine. Il peut par ailleurs être utilisé dans toute autre utilisation d'un système pour la mise en évidence d'anticorps ou d'antigènes. Resumen Un método simple y barato para detectar vacunos infectados con BLV, basado en el principio ELISA modificado Se describe una técnica ELISA modificada, de fases sólidas, para poner en evidencia los anticuerpos del virus de la leucosis bovina (BLV). Para ello, se utilizan unos palillos especiales de poliestirol. En la cabeza redonda de los mismos se hallan adsorbidos los antígenos virósicos. Los anticuerpos BLV fijados a los palillos se identifican con un conjugado IgG-peroxidasa-antivacuno. La reacción se torna visible con 3-amino-9-etilcarbazol. El color pardo rojizo es insoluble y queda fijado a la superficie del palillo. La valoración se hace de forma visual o colorimétricamente tras haber disuelto el color en etanol. La puesta en evidencia de la fijación de los anticuerpos se puede efectuar más adelante con proteína A marcada en el mismo palillo. La técnica es simple y puede llevarse a cabo en escala grande, de forma rutinaria, sin que se precise instrumental especial. La sensibilidad de la prueba corresponde a la del RIA o de la prueba de neutralización de los pseudotipos BLV-VSV. Esta prueba resulta adecuada para los programas rutinarios de selección de leucosis bovina; pero también podría hallar empleo en cualquier otro sistema, en el cual se tuvieran que poner en evidencia anticuerpos o antígenos.