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Isolation of Egg Yolk Immunoglobulin-Rich Fractions Using Copper-Loaded Metal Chelate Interaction Chromatography

1989; Elsevier BV; Volume: 22; Issue: 5 Linguagem: Francês

10.1016/s0315-5463(89)70602-7

2452-1523

A.M. McCannel, S. Nakai,

Viral Infectious Diseases and Gene Expression in Insects

Immunoglobulins were partially purified from egg yolk by metal chelate interaction chromatography (MCIC), after initial preparation of yolk with alginate precipitation. Under the phosphate-buffered equilibration conditions chosen, chicken IgG did bind to the MCIC column when small sample sizes were applied. With increasing amounts applied to the column, IgG was found to be preferentially displaced into the unbound fractions, resulting in an increase in IgG purity in the unbound. By selectively pooling the unbound fractions from a two-thirds copper-saturated 10 mL MCIC column, 104 mg IgG was obtained from four eggs at 75% purity. For industrial applications, the MCIC method described in the present study appears to have several advantages over current methods of yolk IgG separation. A partir de jaune d'oeuf préparé par précipitation à l'alginate, on a purifié partiellement des immunoglobulines à l'aide de la chromatographie par interaction à du chélate métallique (MCIC). Dans des conditions sélectionnées d'équilibrage tamponné au phosphate, de l'IgG de poulet fut fixée sur la colonne MCIC lorsque les échantillons appliqués furent petits. En augmentant les quantités appliquées à la colonne, il fut observé que l'IgG était préférentiellement déplacée dans les fractions non fixées, augmentant ainsi la pureté de l'IgG dans la fraction non fixée. En soutirant sélectivement les fractions non fixées d'une colonne de 10 mL de MCIC saturée au cuivre, il fut possible de recueillir, à partir de quatre oeufs, 104 mg d'IgG à 75% de pureté. La méthode MCIC décrite dans la présente étude semble avoir plusieurs avantages sur les méthodes courantes de séparation de l'IgC du jaune d'oeuf, pour les applications industrielles.