Portal de Periódicos da CAPES

Studies on the peptides, free amino acids and certain related compounds isolated from ox bone

1968; Elsevier BV; Volume: 13; Issue: 5 Linguagem: Inglês

10.1016/0003-9969(68)90112-x

1879-1506

A.G. Leaver, C. Adrian Shuttleworth,

Protein Hydrolysis and Bioactive Peptides

The acid-soluble nitrogenous components of ox bone were fractionated by gel filtration and ion-exchange chromatography. The overall amino acid composition and the relative proportions of free and peptide-bound amino acids in the molecular weight ranges < 750 and 750–5000, were determined by automatic amino acid analysis. The material of mol.wt. < 750 was shown to include 84 per cent bound and 16 per cent free, amino acids. Glycine was predominant (over 50 per cent) with substantial amounts of both dicarboxylic and basic amino acids. Ornithine existed only in the free form while lysine and serine occurred more plentifully in the free than in the peptide bound state. The overall composition of the peptides in the 750–5000 mol.wt. range showed 28 per cent glycine, 13 per cent alanine, 15 per cent basic and 13 per cent dicarboxylic amino acids. High voltage electrophoresis was used to obtain thirteen fractions in each of which one peptide predominated and eight fractions which contained closely related peptides. Amino acid analysis showed these to include fractions containing 80 per cent dicarboxylic acids, others containing 60 per cent basic amino acids, together with “neutral” fractions in which both basic and dicarboxylic acids accounted for over 20 per cent of the total. “Non-polar” peptides with 80 per cent of glycine and alanine were also found together with other fractions rich in serine. No fractions included hydroxyproline and proline was present in only a few. Preliminary investigations of the fractions of mol. wt. > 5000 suggested the possible occurrence of free peptides and glycopeptides, relatively low in carbohydrate content. These fractions contained both hydroxyproline and hydroxylysine but were clearly not collagen fragments. Les composés azotés aciclo-solubles de l'os de boeuf sont séparés par filtration sur gel et chromatographie par échanges d'ions. La composition totale en acides aminés et les proportions relatives en acides aminés libres et liés aux peptides dans le domaine des poids moléculaires < 750 et 750–5000 sont déterminées par analyse automatique d'acides aminés. Le matériel de poids moléculaire < 750 comporte 84 pour cent d'acides aminés liés et 16 pour cent d'acides aminés libres. La glycine est prédominante (audessus de 50 pour cent) avec des quantités importantes d'acides aminés dicarboxyliques et basiques. L'ornithine n'existe que sous forme libre, alors que la lysine et la sérine sont plus fréquentes dans la fraction libre que dans la fraction liée aux peptides. La composition des peptides, dans la fraction de poids moléculaire allant de 750–5000, est la suivante: 28 pour cent de glycine, 13 pour cent d'alanine, 15 pour cent d'acides aminés basiques et 13 pour cent d'acides aminés dicarboxyliques. L'électrophorèse, sous haute tension, permet d'obtenir 13 fractions, dans lesquelles un peptide prédomine et huit fractions qui contiennent des composés voisins des peptides. L'analyse d'acides aminés montre qu'ils contiennent 80 pour cent d'acides dicarboxyliques; d'autres renferment 60 pour cent d'acides aminés basiques ainsi que des fractions neutres dans lesquelles les acides basiques et dicarboxyliques constituent plus de 20 pour cent du total. Des peptides “non polarisés”, renfermant 80 pour cent de glycine et alanine, sont retrouvés avec d'autres fractions dans la sérine. Aucune fraction ne comporte de l'hydroxyproline et la proline n'est présente que dans certaines portions. Des essais préliminaires des fractions de poids moléculaire > 5000 suggèrent la présence possible de peptides et glycopeptides libres, relativement faibles en hydrate de carbone. Ces fractions contiennent à la fois de l'hydroxyproline et l'hydroxylysine, mais il ne s'agit pas de collagène. Durch Gel-Filtration und Ionenaustauscher-Chromatographie wurden die säurelöslichen Stickstoffanteile von Rinderknochen fraktioniert. Der gesamte Aminosäuregehalt und die relativen Anteile freier und Peptid-gebundener Aminosäuren in Molekulargewichtsbereichen < 750 und 750–5000 wurden durch automatische Aminosäureanalyse bestimmt. Das Material mit einem Molekulargewicht < 750 enthielt 84% gebundene und 16% freie Aminosäuren. Glycin stand mit über 50% im Vordergrund neben bemerkenswerten Mengen von Dicarbon- und basischen Aminosäuren. Ornithin kam nur frei vor, während Lysin und Serin gröβerenteils frei als im Peptid-gebundenen Zustand auftraten. Die gesamten Peptide mit einem Molekulargewicht zwischen 750 und 5000 enthielten 28 % Glycin, 13 % Alanin, 15 % basische und 13 % Dicarbon-Aminosäuren. Mit Hilfe der Hochspannungselektrophorese wurden 13 Fraktionen, in denen ein bestimmtes Peptid vorherrschte, weiterhin 8 Fraktionen mit nahe verwandten Peptiden erhalten. Die Aminosäureanalyse ergab, daβ diese Fraktionen 80% Dicarbonsäuren und andere 60% basische Aminosäuren zusammen mit “neutralen” Fraktionen enthielten, bei welchen sowohl basische als auch dicarbonsäuren im Anteil von je 20% vorhanden waren. Weiterhin wurden “nicht-polare” Peptide mit 80 % Glycin und Alanin zusammen mit anderen Serin-reichen Fraktionen gefunden. Keine der Fraktionen enthielten Hydroxyprolin, und Prolin war nur in wenigen vorhanden. Vorläufige Untersuchungen über die Fraktionen mit einem Molekulargewicht > 5000 deuten auf das mögliche Vorkommen freier Peptide und Glycopeptide mit relativ niedrigem Kohlenhydratgehalt hin. Diese Fraktionen enthielten sowohl Hydroxyprolin als auch Hydroxylysin, es waren jedoch sicherlich nicht Kollagenfragmente.