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Respiratory tract organ cultures to assay attachment and pathogenicity of mycoplasmas

1984; Elsevier BV; Volume: 135; Issue: 1 Linguagem: Francês

10.1016/s0769-2609(84)80056-3

1878-2094

Michael G. Gabridge,

Transplantation: Methods and Outcomes

A comparison of various in vitro models of respiratory tissue is presented. Tracheal ring explant cultures can be readily infected with M. pneumoniae. A decrease in vigour and extent of ciliary beating becomes apparent 24–48 h after 60-min exposure to 107 cfu of mycoplasmas. Cytotoxicity can be substantiated with assays of dehydrogenase activity, ATP content and oxygen uptake. For studies of pathogen attachment, perfusion culture of intact tracheas offers a distinct advantage over tracheal-ring explants. A greater proportion of the pathogen uptake is mediated by specific receptor sites because artificial cut surfaces are eliminated. Such matrixembed/perfusion cultures have been used to assay the effectiveness of mycoplasma interactions with receptor site preparations. Triton X-100 effectively solubilizes glycoproteins which will bind with M. pneumoniae. Perfusion culture has also been used to study the synthesis and secretion of mucous glycoprotein by the respiratory epithelium. Une comparaison de divers modèles de cultures in vitro de tissue du tractus respiratoire est présentée. Des cultures explantées de l'anneau trachéal peuvent être facilement infectées avec Mycoplasma pneumoniae. Une diminution de vigueur et de degré du battement ciliaire se manifeste 24 à 48 h après une exposition de 60 min à 107 ufc de mycoplasmes. La cytotoxicité peut être établie par des dosages d'activité déshydrogénase, de contenu d'ATP et d'utilisation d'oxygène. Pour l'étude des liaisons pathogènes, la culture par perfusion de trachées intactes offre un grand avantage sur les explantations de l'anneau trachéal. Une plus grande proportion de liaisons pathogènes a lieu aux sites de récepteur spécifique parce que des surfaces artificielles et «coupées sont éliminées. De telles cultures matrice-encastrées/perfusion ont été utilisées pour essayer l'efficacité de l'interaction mycoplasme et préparations du site récepteur. Le triton-X100 solubilise effectivement les glycoprotéines qui se lieront à M. pneumoniae. La culture par perfusion a aussi été employée pour étudier la synthèse et la sécrétion de la glycoprotéine muqueuse par l'épithélium respiratoire.