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Standard methods for Nosema research

2013; Taylor & Francis; Volume: 52; Issue: 1 Linguagem: Inglês

10.3896/ibra.1.52.1.14

2078-6913

Ingemar Fries, Marie‐Pierre Chauzat, Yanping Chen, Vincent Doublet, Elke Genersch, Sebastian Gisder, Mariano Higes, Dino P. McMahon, Raquel Martín‐Hernández, Myrsini E. Natsopoulou, Robert J. Paxton, Gina Tanner, Thomas C. Webster, Geoffrey R. Williams,

Insect and Arachnid Ecology and Behavior

SummarySummaryMethods are described for working with Nosema apis and Nosema ceranae in the field and in the laboratory. For fieldwork, different sampling methods are described to determine colony level infections at a given point in time, but also for following the temporal infection dynamics. Suggestions are made for how to standardise field trials for evaluating treatments and disease impact. The laboratory methods described include different means for determining colony level and individual bee infection levels and methods for species determination, including light microscopy, electron microscopy, and molecular methods (PCR). Suggestions are made for how to standardise cage trials, and different inoculation methods for infecting bees are described, including control methods for spore viability. A cell culture system for in vitro rearing of Nosema spp. is described. Finally, how to conduct different types of experiments are described, including infectious dose, dose effects, course of infection and longevity tests.ResumenSe describen procedimientos para trabajar con Nosema apis y Nosema ceranae en el campo y en el laboratorio. Para el trabajo de campo, se describen diferentes métodos de muestreo para determinar infecciones al nivel de colonia en un momento determinado, y también para el seguimiento de la dinámica temporal de infección. Se hacen sugerencias para la forma de estandarizar los ensayos de campo para evaluar los tratamientos y el impacto de la enfermedad. Los métodos de laboratorio descritos incluyen diferentes formas de determinar los niveles de infección al nivel de colonia y de abeja individual, y los métodos para la determinación de las especies, incluyendo microscopía óptica, microscopía electrónica y métodos moleculares (PCR). Se hacen sugerencias para estandarizar los ensayos con cajas, y se describen diferentes métodos de inoculación para infectar abejas, incluyendo métodos de control para la viabilidad de las esporas. Se describe un sistema de cultivo celular para la cría in vitro de Nosema spp. Finalmente, se describe cómo llevar a cabo diferentes tipos de experimentos, incluyendo la dosis infecciosa, efectos de la dosis, curso de la infección y las pruebas de longevidad.本文描述了实验室及野外实验中关于孢子虫Nosema apis 和 Nosema ceranae 的研究方法。对于野外实验，本文列举了多种取样方法，用于研究特定时间段内，蜂群群体感染水平，以及随后开展长期感染规律的研究。同时也对如何标准化评估蜂场治疗效果、感病程度及选用哪些指标用于标准化评估提出了建议。实验室方法包括，确定蜂群感染水平及个体蜜蜂感染水平的方法以及测定孢子虫种类的方法，如光学显微镜法，电子显微镜法以及分子方法（PCR）。对于如何标准化蜂笼实验的各项指标提出了建议，并描述了感染蜜蜂的不同接种方法，包括孢子生存能力的对比法。描述了孢子虫的一种体外细胞培养体系。最后描述了如何进行不同类型的实验，包括感染剂量、剂量效能、感染过程以及寿命试验。Keywords: Nosema apisNosema ceranaefield methodslaboratory methodssampling methodsinfection dynamicsinfection levelmicroscopyspecies identificationstandardised cage trialsinoculation methodsspore viabilitycell cultureinfectious dosedose effectscourse of infectionlongevity testshoney beeBEEBOOKCOLOSS