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Reduced DNA topoisomerase II in VP-16 resistant mouse breast cancer cell line

1990; Elsevier BV; Volume: 44; Issue: 1 Linguagem: Francês

10.1016/0753-3322(90)90068-k

1950-6007

Hong JH, Kosuke Okada, Toshihisa Kusano, Y Komazawa, M Kobayashi, Akiko Mizutani, N Kamada, Atsushi Kuramoto,

Neutropenia and Cancer Infections

VP-16 resistant cells, Fvpr50 (50B-3), were isolated from mouse breast cancer cell line FM3A. 50B-3 cells showed 84-fold higher resistance than their parent cells. Reduced drug uptake was not found in resistant cells. Quantitative analysis of drug-stimulated DNA cleavage activity using 3'32P end-labeled pBR322 restriction fragments showed that VP-16 stimulated DNA-topoisomerase II cleavable complex forming activity in crude nuclear extract from 50B-3 cells was approximately one-fifth as compared with that of FM3A wild-type cells. Dot-blot analysis of RNA extracted from the two cell lines showed that mRNA levels of topoisomerase II in 50B-3 cells drastically decreased and catalytic activity was also 12–13 as compared with that of parent cells. 50B-3 cells showed cross resistance to VM-26, m-AMSA, adriamycin. Thes findings suggest that reduced topoisomerase II activity (cellular levels) and cleavable complex forming activity may be significant factors in the marked drug resistance. DNA topoisomerase II / VP-16 / drag resistance. Réduction de topoisomérase II-ADN dans une lignée cellulaire de cancer mammaire résistante au VP-16. Des cellules résistantes au VP-16 ef désignées sous le nom de FvprB350 (50B-3) ont été isolées à partir de la lignée cellulaire de cancer mammaire murilt FM3A. i.es cellules 50B-3 ont montré une résistance 84 fois supérieure à celle deleurs cellules d'origine. Il n'a pas été trouvé de déficit de fixation du produit dans les cellules résistantes. Une analyse quantitative de l'activité de clivage de l'ADN sous stimulation par le produit avec une technique utilisant des segments de restrictions 322 marqués en terminal au 3'32P a montré que l'activité de formation de complexes ADN-topoisomérase II clivables, activité stimulée par le VP-16, représentait dans un extrait brut de noyau provenant de cellules 50B-3 environ 115 de celle des cellules FM3A de type sauvage. Une analyse par Dot-blot de l'ARN extrait de chacune des deux lignées de cellules a montré que le taux d'ARNm portant le code de la topoisomérase II dans les cellules 50B-3 décroissait d'une façon spectaculaire et que l'activité catalytique représentait également 112 à 113 de celle des cellules-mères. Les cellules 50B-3 ont montré une résistance croisée au VM26, à la m-AMSA et à l'adriamycine. Ces résultats suggèrent que la réduction de l'activité topoisomérase II (au niveau cellulaire) et de l'activité déformation de complexes clivables pourraient jouer un rôle important dans la profonde résistance constatée par rapport au médicament,. topoisomérase II-ADN / VP-16 / résistance.