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Sur la moindre résistance a l'hydrolyse acide des liaisons peptidiques situées a côté d'une fonction hydroxyle

1948; Elsevier BV; Volume: 2; Linguagem: Francês

10.1016/0006-3002(48)90008-0

1878-2434

P. Desnuelle, A. Casal,

Advanced Glycation End Products research

Au cours du présent travail nous avons appliqué à des hydrolysats chlorhydriques partiels de diverses protéines la technique d'oxydation periodique et la technique de Sanger au dinitrofluorobenzéne. Ces aeux techniques permettent d'obtenir des renseignements qualitatifs et quantitatifs sur les amino-acides situés à l'extrémité aminée des chaînes peptidiques. Mais tandis que la premiére est étroitement limitée au domaine des acides β hydroxylés, la seconde, plus générale, embrasse presque tous les acides. Nous avons alors pu montrer que: 1. la stabilité à l'hydrolyse acide des liaisons peptidiques oú un acide β hydroxylé se trouve impliqué par sa fonction amine (liaisons[1]), est bien inférieure à la stabilité moyenne des autres liaisons; 2. les différences observées sont d'autant plus importantes que l'acide est plus concentré et la température d'hydrolyse plus basse. 3. de tous groupements libres protéiques, les groupements - OH sont les seuls, dans nos conditions expérimentales, à exercer un effet labilisateur notable sur les liaisons peptidiques situées à leur voisinage immédiat. L'influence des groupes -SH et la vitesse d'hydrolyse des liaisons de la proline n'ont pu toutefois être étudiées. Nous présentons alors une hypothèse basée sur certains résultats expérimentaux, tendant à expliquer l'instabilité particuliére des liaisons (I) par la formation à niveau d'un cycle oxazoline provoquant le transfert de la chaîne acylée de l'azote sur l'oxygéne. Certains points concernant, d'une part, la formation d'ammoniaque dans les hydrolysats protéiques et, d'autre part, l'existence de bouts de chaînes peptidiques dans l'albumine d'oeuf et la fibroïne de la soie ont été enfin subsidiarement évoqués. In the present work we have applied to hydrochloric partial hydrolysates of various proteins the periodic oxidation technique and Sanger's dinitrofluorobenzene technique. These two techniques give qualitative and quantitative information on the amino acids at the amino extremities of peptide chains; but while the first limited to the β-hydroxy-acids, the second, and more general, method applies to almost all acids. We have thus been able to show that: 1. The stability to acid hydrolysis of peptide linkages where a β-hydroxy-acid is involved as an amine (linkages (I)) is much less than the average stability of other linkages. 2. The observed differences become more important as the concentration of the acid is raised and the temperature of hydrolysis is lowered. 3. Of all the free groups present in proteins, only the OH groups, in our experiments, are found to exercise any appreciable effect of labilisation on peptide linkages situated in their immediate neighbourhood. It has not, however, been possible to study the influence of SH groups and the speed of hydrolysis of the proline linkages. We put forward a hypothesis, based on certain experimental results, with the view of explaining the particular instability of linkages (I) by the formation at their level of an oxazoline ring by the transfer of the acylated chain from the nitrogen to the oxygen. Finally, certain points have also been considered that have to do with the formation of ammonia in protein hydrolysates on the one hand, and on the other, with the existence of chain-endings in egg albumin and silk fibroin. Im Laufe der vorliegenden Arbeit haben wir auf partielle Salzsäurehydrolysate verschiedener Eiweisskörper die Methode der Perjodtoxydation und die Methode von Sanger mit Dinitrofluorbenzen angewandt. Diese beiden Methoden ermöglichen es, qualitative und quantitative Aufschlüsse über die am aminierten Ende der Peptidketten gelegenen Aminosäuren zu erhalten. Während aber die erste Methode eng auf das Gebiet von β-Hydroxysäuren beschränkt ist, umfasst die zweite, allgemeinere, beinahe alle Säuren. Wir konnten zeigen, dass: 1. bei Säurehydrolyse die Stabilität der Peptidbindungen, an denen eine β-Hydroxysäure mit ihrer Aminfunktion beteiligt ist ((I) Bindungen), deutlich geringer ist als die durchschnittliche Stabilität anderer Bindungen. 2. die Beobachteten Unterschiede desto deutlicher sind, je konzentrierter die Säure und je niedriger die Hydrolysetemperatur ist; 3. unter unseren experimentellen Bedingungen, von allen freien Gruppen in Eiweisskörpern die-OH-Gruppen die einzigen sind, die einen deutlichen Labilisator-effekt auf Peptidbindungen in ihrer unmittelbaren Nähe ausüben. Der Einfluss von-SH-Gruppen und die Hydrolysegeschwindigkeit von Prolinbindungen konnten noch nicht untersucht werden. Wir stellen auich eine auf gewissen experimentellen Resultaten beruhende Hypothese auf, die die besondere Instabilität der (I)-Bindungen durch die Bidlung eines Oxazolinringes, der die Übertragung der azylierten Kette vom Stickstoff auf den Saurestoff hervorruft, erklänen soll. Einige Punkte, die einerseits die Bildung von Ammoniak in Eiweisshydrolysaten, und andererseits die Existenz von Enden von Peptidketten bei Ei-albumin und Seidefibroin betreffen, werden schliesslich auch erwähnt.