Phosphomonoesterase activity in hepatic tissues of the mouse
1952; Elsevier BV; Volume: 8; Linguagem: Inglês
10.1016/0006-3002(52)90027-9
ISSN1878-2434
Autores Tópico(s)Phytase and its Applications
Resumo1. Accurate quantitative methods for the assay of phosphomonoesterase activity at pH 5.5 and 9.2 within fresh liver homogenates were presented using phenylphosphate as the substrate. 2. The levels of phosphomonoesterase activity at pH 5.5 and 9.2 were determined for normal adult and regenerating hepatic tissues of the mouse. Although increases in phosphomonoesterase activity were found at pH 9.2 within the regenerating tissues, little differences were observed in enzyme levels at pH 5.5. 3. Centrifugation techniques were incorporated to investigate the relative distribution of phosphomonoesterase activity at both pH 5.5 and 9.2 within normal and regenerating hepatic tissues of the mouse. All separated fractions from normal adult mouse liver were found to contain phosphomonoesterase active at pH 5.5 and 9.2. Enzyme active at pH 5.5 appeared to be concentrated within the submicroscopic or microsomal fraction. Little concentration of enzyme active at pH 9.2 was found within any of the sedimented fractions of normal mouse liver; however, a concentration of this enzyme was present within the nuclear fractions isolated from regenerating liver. Extensive extraction of enzyme active at pH 9.2 from particulate components was suspected. 4. Differences in inactivation rates, sedimentability and relative alterations within regenerating liver were found between phosphomonoesterase active at pH 5.5 and 9.2 suggesting the presence of separate enzymes acting at these hydrogen ion concentrations. 1. Nous présentons des méthodes quantitatives exactes pour la détermination de l'activité phosphomonoestérasique à pH 5.5 et 9.2 dans des homogénats de foie frai, utilisant le phénylphosphate comme substrat. 2. Les niveaux d'activité phosphomonoestérasique à PH 5.5 et 9.2 ont été déterminés pour des tissus hépatiques, adultes normaux et en régénération, de souris. A PH 9.2 nous avons observé une augmentation de l'activité phosphomonoestérasique dans les tissus en régénération, par contre à pH 5.5, nous avons trouvé peu de différences entre les niveaux d'activité enzymatique. 3. Nous avons appliqué des techniques de centrifugation pour étudier la distribution relative de l'activité phosphomonoestérasique à pH 5.5 et 9.2 dans les tissus hépatiques normaux et en régénération de la souris. Nous avons trouvé que toutes les fractions isolées de foie de souris adulte normal contenaient de la phosphomonoestérase active à pH 5.5 et 9.2. L'enzyme active à pH 5.5 était concentrée dans la fraction submicroscopique ou microsomale. La concentration de l'enzyme active à pH 9.2 était faible dans toutes les fractions sédimentées de foie de souris normal; par contre cette enzyme était concentrée dans les fractions nucléaires isolées à partir de foie en régénération. Nous avons supposé qu'une extraction importante de l'enzyme active à pH 9.2 à partir de certaines composantes a eu lieu. 4. Les différences de vitesse d'inactivation, de sédimentabilité et d'altération relative dans le foie en régénération, trouvées entre la phosphomonoestérase active à pH 5.5 et celle active à 9.2 font prévoir la préence d'enzymes différentes agissant à ces concentrations d'ions hydrogéne. 1. Genaue quantitative Methoden zur Bestimmung der Phosphomonoesterase-Aktivität bei pH 5.5 und pH 9.2 in frischem Leberhomogenat unter Verwendung von Phenylphosphat als Substrat wurden beschrieben. 2. Die Höhe der Phosphomonoesterase-Aktivität bei pH 5.5 und 9.2 für normales und regenerierendes Lebergewebe der Maus wurde bestimmt. Obwohl bei pH 9.2 im regenerierenden Gewebe eine Zunahme der Phosphomonoesterase-Aktivität beobachtet wurde, konnten bei pH 5.5 nur wenig Unterschiede in der Höhe der Enzym-Aktivität festgestellt werden. 3. Zum Studium der relativen Verteilung der Phosphomonoesterase-Aktivität bei pH 5.5 und 9.2 in normalen und regenerierenden Lebergeweben der Maus wurden Zentrifugiermethoden eingeschaltet. Alle Fraktionen aus normaler Mäuseleber enthielten bei pH 5.5 und 9.2 aktive Phosphomonoesterase. Es zeigte sich, dass das Enzym, welches bei pH 5.5 aktiv ist in der submikroskopischen oder Mikrosom-Fraktion konzentriert war. Das bei pH 9.2 wirkende Enzym war in allen sedimentierten Fraktionen von normaler Mäuseleber wenig konzentriert; dagegen war dieses Enzym in den aus regenerierender Leber isolierten Kernfraktionen konzentriert. Es wurde angenommen, dass das bei pH 9.2 wirkende Enzym aus verschiedenen Bestandteilen stark extrahiert worden war. 4. Zwischen der bei pH 5.5 und der bei pH 9.2 wirkenden Phosphomonoesterase wurden Unterschiede festgestellt, die sich auf die Inaktivierungsgeschwindigkeit, die Sedimentierbarkeit und die Zerstörung innerhalb des regenerierenden Lebergewebes beziehen; auf Grund dieser Unterschiede wird auf das Vorhandensein zweier verschiedener Enzyme, welche bei den genannten Wasserstoffionen-Konzentrationen w wirksam sind, geschlossen.
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