Cinética de crecimiento in vitro de osteoblastos humanos sobre cerámica porosa de hidroxiapatita
2006; Elsevier BV; Volume: 50; Issue: 3 Linguagem: Espanhol
10.1016/s1888-4415(06)76387-1
ISSN2340-5392
AutoresLuis Meseguer‐Olmo, J. Muñoz-Ruiz, Eusebio Bernabéu, Marie Nolla, D. Arcos-Pérez, Maria Vallet‐Regí, Fernando A. Lopez‐Prats, A. Lax‐Pérez, C.L. Meseguer-Ortiz de Villajos,
Tópico(s)Dental Implant Techniques and Outcomes
ResumoEstudio de la respuesta in vitro de osteoblastos humanos frente a una cerámica porosa de hidroxiapatita para su consideración como matriz en ingeniería tisular. Se han aislado caracterizado y cultivado osteoblastos humanos. Se sembraron sobre discos del material y sobre plástico (control) y se ha estudiado mediante técnica de reducción de la sal de tetrazolio su adherencia, extensión y proliferación. Se comprobó sus características funcionales, determinando la producción de fosfatasas alcalinas, osteocalcina, colágeno I y mineralización in vitro. Las células se adhirieron y crecieron sobre la superficie del material, y en el interior de los poros. A las 24 horas se adhirieron el 20% de las células sembradas, mientras que en el control lo hicieron el 95%, además, se observó un crecimiento más lento. La producción de fosfatasas alcalinas, osteocalcina y colágeno I por las células que crecieron sobre la cerámica fue positiva y en similar rango que los controles. Los osteoblastos colonizaron la cerámica de forma más lenta que el control, mantuvieron su fenotipo y produjeron matriz extracelular. El ensayo de reducción de las sales de tetrazolio (XTT) fue satisfactorio para cuantificar la proliferación de osteoblastos sobre la cerámica. El modelo utilizado permite cuantificar y observar la funcionalidad in vitro de osteoblastos en respuesta a cerámicas de hidroxiapatita. En función de los resultados obtenidos el material utilizado en el estudio puede ser considerado, en el campo de la ingeniería tisular, como una matriz adecuada para soportar el crecimiento de osteoblastos humanos. To study the in vitro response of human osteoblasts when in contact with porous hydroxyapatite ceramics, with a view to considering them a matrix for tissue engineering. Human osteoblasts were isolated, characterized and cultured. They were seeded onto discs made of HA and onto a plastic material (control) and their adhesiveness, extension and proliferation were studied by means of a tetrazolium salt reduction test. Their functional characteristics were examined in order to determine the production of alkaline phosphatases, osteocalcin, collagen I as well as in vitro mineralization. The cells adhered to and grew onto the material’s surface and inside its pores. Within 24 hours, 20% of seeded cells had adhered; in the control group this percentage was 95% and the growth was slower. The cells growing onto the ceramics were found to produce alkaline phosphatases, osteocalcin and collagen in amounts similar to those in the control group. Osteoblasts colonized the ceramics at a lower pace than plastic; they also retained their phenotype and generated extracellular matrix. The tetrazolium salt reduction test served the purpose of validating the proliferation of osteoblasts on the ceramics. The model used makes it possible to quantify and observe the in vitro functionality of osteoblasts in their response to hydroxyapatite ceramics. On the basis of the results obtained, the material used in the study can be considered, in the field of tissue engineering, a suitable matrix to support the growth of human osteoblasts.
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