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Studien über das Exotoxin des Corynebakterium pyogenes nach Reinigung mittels Gelfiltration und DEAE-Ionenaustauscher

2010; Wiley; Volume: 25; Issue: 7 Linguagem: Alemão

10.1111/j.1439-0450.1978.tb00768.x

0931-2021

K. Katsaras, U. P. Zeller,

Chromatography in Natural Products

Zusammenfassung Das durch Ammoniumsulfatlösung ausgefällte und mittels Chromatographie an Sephadex G-150 bzw. DEAE-Zellulose gereinigte Exotoxin von C. pyogenes-Stamm NCTC 5224 zeigte hämolytische, letale und die Haut nekrotisierende Eigenschaften. Die Reinigung des C. pyogenes-Toxins mittels Sephadex G-150 war vollständiger als durch die DEAE-Zellulose. Alle 3 extrazellulären Eigenschaften waren die Funktion eines Proteins, das in seiner Wirksamkeit durch Pronase und Papain zerstört, jedoch Trypsin, Protease, DNase, RNase sowie Lysozym nicht beeinflußt wurde. Das Molekulargewicht des C. pyogenes-Toxins betrug 36 000 Dalton. Konzentrations- und Chromatographie-Verfahren minderten den Wirksamkeitsgrad des Toxins. Frau Martha Kazmierczak danken wir für die experimentelle Arbeit. Summary Studies on the exotoxin of Corynebacterium pyogenes after purification by gel filtration and DEAE ion exchanger The exotoxin of Corynebacterium pyogenes strain NCTC 5224, which was precipitated by ammonium sulfate and was purified by Sephadex G-150 or DEAE-cellulose, had the properties of haemolysis, lethality, and skin necrosis. The purification of Corynebacterium pyogenes toxin by Sephadex G-150 was more complete than by DEAE-cellulose. All three extracellular properties were caused by a protein. The effectiveness of the toxin was destroyed by pronase and papain, but was not attacked by trypsin, protease, DNase, RNase, and lysozyme. The molecular weight of Corynebacterium pyogenes toxin was 36 000 Dalton. Concentration and chromatography procedures reduced the effect of the toxin. Résumé Etudes sur l'exotoxine de Corynebacterium poygenes après purification au moyen de filtration sur gel et d'échangeur d'ions DEAE L'exotoxine de C. pyogenes, souche NCTC 5224, précipité par une solution de sulfate d'ammonium et purifiée par chromatographie sur Sephadex G-150 et DEAE-cellulose, a montré des propriétés hémolytiques, létales et nécrosantes de la peau. La purification de la toxine de C. pyogenes fut plus complète par Sephadex G-150 que par DEAE-cellulose. Toutes les trios propriétés extracellulaires furent la pronase et la papaïne, alors que la trypsine, protease, DNase, RNase et lysozyme n'ont pas eu d'influence. Le poids moléculaire de la toxine de C. pyogener était de 36 000 Dalton. Les procédés de concentration et de chromatographie ont diminué le degré d'action de la toxine. Resumen Estudios sobre la exotoxina del Corynebacterium pyogenes tras purificación mediante filtración por gelosa e intercambiador de iones DEAE La exotoxina de la estirpe C. pyogenes NCTC 5224, precipitada mediante solución de sulfato amónico y purificada por medio de Sephadex G-150 resp. celulosa DEAE, presentaba propiedades hemolíticas, letales y dermatonecrosantes. La purificación de la toxina de C. pyogenes mediante Sephadex G-150 era más completa que por medio de celulosa DEAE. Todas las 3 propiedades extracelulares eran la función de una proteína, cuya actividad se destruía con pronasa y papaína, mas no era afectada por tripsina, proteasa, DNasa, RNasa ni lisozima. El peso molecular de la toxina del C. pyogenes era del orden de 36.000 daltones. Los procedimientos de concentración y cromatográficos disminuían el grado de actividad de la toxina.