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Anémie hémolytique congénitale non sphérocytaire par déficit en G-6PD: Etude physiologique et biochimique d'une variante inhabituelle. Rapport avec la G-6PD “Benevento”

1973; Elsevier BV; Volume: 55; Issue: 9 Linguagem: Francês

10.1016/s0300-9084(73)80451-1

1638-6183

A Kahn, Jacqueline Leger, Pierre Boivin, D Hollard, J Hakim,

Erythrocyte Function and Pathophysiology

An abnormal G6PD is described in two brothers of an italian mother. The clinical features were acute haemolysis appearing on a background of a chronic mild haemolysis. The enzyme characteristics were as follows:u— Unmeasurable activity in the haemolysate and below 5 p. cent of the normal in platelets and in white blood cells.— A very decreased Michaelis constants for G6P (6 μM) and for NADP (0.8 μM).— A very abnormal utilization of 2-deoxy glucose-6-phosphate (> 300 p. cent) of galactose-6-phosphate (150 p. cent) and of deamino NADP (⋍ 500 p. cent).— A biphasic pH curve with two peaks, one at 5.0 and the other at 10.0.— An increased thermolability and a normal activation energy of the thermal inactivation reaction.— An activation energy of the enzymic reaction at the upper limit of the normal (13.7 K Cal.Mole).— An increased NADPH inhibition constant (180 μM) versus 50 μM in the controls). — Unmeasurable activity in the haemolysate and below 5 p. cent of the normal in platelets and in white blood cells. — A very decreased Michaelis constants for G6P (6 μM) and for NADP (0.8 μM). — A very abnormal utilization of 2-deoxy glucose-6-phosphate (> 300 p. cent) of galactose-6-phosphate (150 p. cent) and of deamino NADP (⋍ 500 p. cent). — A biphasic pH curve with two peaks, one at 5.0 and the other at 10.0. — An increased thermolability and a normal activation energy of the thermal inactivation reaction. — An activation energy of the enzymic reaction at the upper limit of the normal (13.7 K Cal.Mole). — An increased NADPH inhibition constant (180 μM) versus 50 μM in the controls). The decreased Michaelis constants for G6P and for NADP and the increased inhibition constant for NADPH are discussed with regard to the contrast observed between the mild haemolytic anemia and the overt G6PD deficiency. The nitroblue tetrazolium reduction by the polymorphonuclear cells after latex engulfment was decreased; this abnormality of these very G6PD deficient polymorphonuclear leukocytes emphasizes the important part which this enzyme plays in the biochemical events occuring during the phagocytosis. However the lack of increased susceptibility towards infections in the two patients contradicts the exclusive responsability of this enzyme in the mechanism of infections in patients with chronic granulomatous desease. Studies of substrate analogue utilization and the Km and Vmax variations as a function of the pH suggest a mutation which modifies the ionisation conditions of some ionisable groups involved in the catalytic process of G6PD. The kinetic and thermodynamic caracteristics of this variant of G6PD are close to those of Gd (—) Benevento except for the level of the deficiency. The authors suggest that this pathologic enzyme be designed «Beneventolike as long as the two variants are not completely studied, by the same methods and in the same laboratory. Les auteurs décrivent une glucose-6-déshydrogénase anormale chez deux frères de mère italienne. Le tableau clinique est celui d'une hémolyse chronique modérée entrecoupée de poussées hémolytiques aiguës. L'enzyme a les caractéristiques suivantes:u— Activité indosable dans l'hémolysat et inférieure à 5 p. cent de la normale dans les plaquettes et les leucocytes.— Mobilité électrophorétique à 90–95 p. cent de la normale.— Constantes de Michaelis très diminuées pour le glucose-6-phosphate (6 μM) et le NADP (0,8 μM).— Utilisation très augmentée du 2-deoxy glucose-6-phosphate (> 300 p. cent), du galactose-6-phosphate (150 p. cent), et du deamino NADP (⋍ 500 p. cent).— Courbe de pH très biphasique, avec deux pics d'activité à pH 5,5 et 10.— Grande thermolabilité, avec une énergie d'activation de la réaction d'inactivation thermique dans les limites de la normale.— Energie d'activation de la réaction enzymatique à la limite supérieure de la normale [12, 7].— Une constante d'inhibition par le NADPH très augmentée (180 μM au lieu de 50 μM). — Activité indosable dans l'hémolysat et inférieure à 5 p. cent de la normale dans les plaquettes et les leucocytes. — Mobilité électrophorétique à 90–95 p. cent de la normale. — Constantes de Michaelis très diminuées pour le glucose-6-phosphate (6 μM) et le NADP (0,8 μM). — Utilisation très augmentée du 2-deoxy glucose-6-phosphate (> 300 p. cent), du galactose-6-phosphate (150 p. cent), et du deamino NADP (⋍ 500 p. cent). — Courbe de pH très biphasique, avec deux pics d'activité à pH 5,5 et 10. — Grande thermolabilité, avec une énergie d'activation de la réaction d'inactivation thermique dans les limites de la normale. — Energie d'activation de la réaction enzymatique à la limite supérieure de la normale [12, 7]. — Une constante d'inhibition par le NADPH très augmentée (180 μM au lieu de 50 μM). Les auteurs discutent des rapports entre les faibles constantes de Michaelis pour le G6P et le NADP et l'augmentation de la constante d'inhibition pour le NADPH d'une part, la relative discrétion du retentissement hématologique contrastant avec l'intensité du déficit d'autre part. L'anomalie de la réduction du nitrobleu de tetrazalian lors de la phagocytose des particules de latex par les polynucléaires presque totalement déficitaires en G6PD souligne la place de cette enzyme dans les phénomènes biochimiques qui accompagnent et suivent la phagocytose. Cependant l'absence de toute symptomatologie infectieuse dans les deux cas étudiées permet de répéter la responsabilité exclusive de cette enzyme dans le mécanisme des infections des malades atteints de granulomatose chronique léthale de l'enfant, comme cela a été suggéré par certains auteurs. L'étude de l'utilisation des analogues des substrats et de la variation des Km et de la Vmax en fonction du pH évoque une mutation qui modifierait les conditions d'ionisation de certains groupes ionisables fondamentaux dans l'acte catalytique de cette G6PD. Les caractéristiques cinétiques et thermodynamiques de cette variante la rapprochent de la Gd (—) Benevento dont elle diffère néanmoins par l'intensité du déficit. Les auteurs proposent de désigner cette enzyme pathologique comme « Benevento - Likeen attendant de pouvoir comparer les deux variantes plus complètement selon les mêmes méthodes d'un même laboratoire.