Produção Nacional
Integração de pAN7-1 no genoma de Magnaporthe grisea mediada por enzima de restrição
2006; Springer Nature; Volume: 31; Issue: 3 Linguagem: Português
10.1590/s0100-41582006000300003
ISSN1678-4677
AutoresCarlos Eduardo Marchi, Sérgio Hermínio Brommonschenkel, Marisa Vieira de Queiroz, Eduardo S. G. Mizubuti,
Tópico(s)Fungal and yeast genetics research
ResumoVisando explorar a mutagênese insercional em Magnaporthe grisea, foram avaliadas a transformação dos protoplastos obtidos após adequação do protocolo e a eficiência da integração de pAN7-1 no genoma do ascomiceto na presença da enzima de restrição Hind III. Os protoplastos de M. grisea I-22 foram prontamente transformados para a resistência à higromicina. Quando o vetor linearizado com Hind III foi usado para transformar o fungo na presença de Hind III, a eficiência de transformação foi 1,1 a 8,1 vezes superior ao tratamento sem a adição da enzima. No geral, a melhor concentração de Hind III foi 5 unidades/reação de transformação. Tal concentração promoveu a produção média de 332 transformantes/µg de pAN7-1/10(7) protoplastos. A presença do gene de seleção hph no genoma de 18 indivíduos resistentes à higromicina foi confirmada por PCR.
Referência(s)