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The use of monoclonal antibodies to identify mycobacteria grown in culture in Zimbabwe

1993; Churchill Livingstone; Volume: 74; Issue: 3 Linguagem: Espanhol

10.1016/0962-8479(93)90011-l

1532-219X

P. R. Mason, Lovemore Gwanzura, Odette Lowe, A H Kolk,

Bacteriophages and microbial interactions

Monoclonal antibodies (Mabs) were used in an ELISA system to identify 462 mycobacterial isolates from clinical specimens in Zimbabwe. Cultures of mycobacteria were either sonicated or mechanically homogenised and used to coat the wells of microtitre plates. The mouse Mabs used reacted to lipoarabinomannan, an antigen common to all species of mycobacteria, to a 16 kDa protein specific to members of the Mycobacterium tuberculosis complex, to a glycolipid found in the cell wall of M. kanasii and to a glycolipid found in the cell wall of members of the M. avium-intracellulare complex. On the basis of serologic reactivity 443/462 (94%) isolates were identified as M. tuberculosis, 6/462 (1%) were identified as M. avium-intracellulare and 7/462 (2%) were identified as M. kansasii. The remaining 16 isolates gave negative reactions with each of the monoclonals, except that reactive with lipoarabinomannan. On the basis of biological tests on the 13 of the isolates that were available, 6 were identified as M. tuberculosis and 3 as M. bovis. In each of these the optical densities in the ELISA with at least one of the Mabs directed against the 16 kDa protein, was within 0.2 units of the cut off value. 4 isolates were not identifiable using biological tests in our laboratory. Each of the available isolates identified serologically as M. avium-intracellulare or M. kansasii gave biological reactions consistent with this identification. This study has shown Mab-ELISA to be a reliable means of rapidly identifying large numbers of mycobacterial isolates in a reference laboratory in Zimbabwe. It is noteworthy that despite the high prevalence of HIV in tuberculosis patients in Zimbabwe, very few were infected with atypical mycobacteria. Des anticorps monoclonaux (Mabs) ont été utilisés dans un système ELISA afin d'identifier 462 isolats mycobactériens à partir des prélèvements cliniques, en Zimbabwe. Les cultures de mycobactérie ont été soit soumises à des techniques ultrasoniques, soit homogénéisées par technique mécanique et utilisées pour enduire les orifices de lames microtitrées. Les Mabs de souris utilisées montraient une réaction au lipoarabinomannan, un antigène commun à toutes les espèces de mycobactéries, à une protéine de 16 kDa spécifique des composants du complexe Mycobacterium tuberculosis, à un glycolipide trouvé dans le paroi de M. kansasii et à un glycolipide trouvé dans la paroi des composants du complexe M. avium intravellulare. Sur la base de la réactivité sérologique, 433/462 (94%) des isolats ont été identifiés comme M. tuberculosis, 6/462 (1%) ont été identifiés comme M. avium intracellulare et 7/462 (2%) ont été identifiés comme M. kansasii. Les 16 isolats restants ont montré des réactions négatives pour chacun des anticorps monoclonaux, sauf celui qui réagissait au lipoarabinomannan. Sur la base des tests biologiques effectués sur les 13 isolats utilisables, 6 ont été identifiés comme M. tuberculosis et 3 comme M. bovis. Chez chacun d'eux la densité optique dans l'ELISA avec au moins un des Mabs dirigé contre la protéine de 16 kDa était jusqu'à 0,2 unités du point de séparation. 4 isolats n'ont pu être identifiés sur les tests biologiques utilisés dans notre laboratoire. Chacun des isolats utilisables identifiés sérologiquement comme M. avium intracellulare ou M. kansasii a donné des réactions biologiques compatibles avec cette identification. Cette étude a montré que le Mab-ELISA peut être un moyen fiable d'identifier rapidement de nombreux isolats mycobactériens dans un laboratoire de référence au Zimbabwe. Il est à noter que malgré la haute prévalence de l'infection VIH chez les malades tuberculeux au Zimbabwe, très peu étaient infectés par mycobactérie atypique. En Zimbabwe, se utilize anticuerpos monoclonales en un sistema ELISA, para identificar 462 aislados micobacterianos de muestras cínicas. Se utilizó cultivos de micobacterias homgeneizados mecànicamente o por ultrasonidos, para cubrir las paredes de las placas de microtítulo. Los anticuerpos monoclonales de ratón lutilizados fueron aquéllos contra: lipoarabinomannan, un antígeno común a todas las micobacterias, una proteína 16 kDa específica a todos los miembros del complejo Mycobacterium tuberculosis, un glicolípido encontrado en la pared celular de M. kansasii y un glicolípiodo encontrado en la pared celular de los miembros del complejo M. avium-intracellulare. En base a la reactividad serologica, 433/462 (94%) de los aislados fueron identificados como M. tuberculosis, 6/462 (1%) como M. avium-intracellulare y 7/462 (2%) como M. kansasii. Los 16 aislados restantes dieron reacciones negativas con cada uno de los anticuerpos monoclonales, excepto con aquél contra lipoarabinomannan. En base a pruebas biológicas realizadas en 13 de estos aislados que estaban disponibles, 6 fueron identificados como M. tuberculosis y 3 como M. bovis. En cada uno de éstos, la densidad óptica en la prueba ELISA, con por lo menos uno de los anticuerpos monoclonales dirigidos contra la proteina 16 kDa, estaba dentro del límite de 0,2 unidades a partir del valor de separación. Cuatro aislados no fueron identificables con la utilizatión de las pruebas biológicas en nuestro laboratorio. Cada uno de los aislados disponibles, identificados serológicamente como M. avium intrecellulare o como M. kansasii, dieron reacciones serológicas concordantes con esta identificatión. Este estudio ha mostrado que la prueba ELISA con anticuerpos monoclonales es un medio confiable para identificar rápidamente un gran número de aislados micobacterianos en un laboratorio de referenda en Zimbabwe. Merece ser mencionado el hecho que, a pesar de la alta prevalencia de infectión VIH en los pacientes tuberculosos en Zimbabwe, son escasos los infectados con micobacterias atípicas.