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Immunohistochemical detection of infectious bursal disease and infectious bronchitis viral antigens in fixed, paraffin‐embedded chicken tissues

1986; Taylor & Francis; Volume: 15; Issue: 3 Linguagem: Inglês

10.1080/03079458608436301

1465-3338

Lisa Jönsson, B. Engström,

Virology and Viral Diseases

Summary Immunoperoxidase and immunofluorescent techniques were used to detect and localise infectious bursal disease virus (IBDV) and infectious bronchitis virus (IBV) in fixed, paraffin‐embedded chicken tissues. A modified Bouin's solution (9 parts of 1% picric acid to 1 part of 10% neutral buffered formalin and 5% acetic acid) proved to be the fixative of choice. Tissues fixed in 10% neutral buffered formalin showed heavy background staining, whereas enzyme treatment of these tissues succeeded in exposing viral antigens and thus giving a specific reaction. For routine diagnostic purposes it will prove advantageous to detect IBDV and IBV in fixed, paraffin‐embedded material. Resume Les techniques d'immunopéroxidase et d'immunofluorescence ont été utilisées pour détecter et localiser les virus de la bursite infectieuse (IBDV) et de la bronchite infectieuse (IBV) dans les tissus de poulets fixés, inclus dans la paraffine. Une solution modifiée de Bouin (9 parties d'acide picrique à 1% mélangée à une partie de formo neutre tamponné à 10% et d'acide acétique à 5%) s'est révélée être un fixateur de choix. Les tissus fixés dans du formol tamponné neutre à 10% ont montré des colorations de fond importantes alors que le traitement enzymatique de ces tissus a permis de révéler les antigènes viraux en donnant ainsi une réaction spécifique. Pour les besoins du diagnostic de routine, il apparaît plus avantageux de détecter l'IBDV et l'IBV dans du matériel fixé, inclus dans la paraffine. Zusammenfassung Die Immunoperoxidase — und die Immunofluoreszenztechnik wurden zum Nachweis und zur Lokalisierung des Virus der Infektiösen Bursitis (IBDV) und der Infektiösen Bronchitis (IBV) in fixierten, in Paraffin eingebetteten Hühnergeweben angewandt. Als Fixierungsmittel der Wahl erwies sich eine modifizierte Bouinlösung (9 Teile einer 1%‐igen Pikrinsäure auf 1 Teil von 10%‐igen gepufferten neutralen Formalin und 5% Essigsäure). Nach einer Fixierung in 10% gepuffertem neutralen Formalin zeigten die Gewebe eine starke Hintergrundfärbung, während mit der Enzymbehandlung dieser Gewebe virale Antigène aufgedeckt und damit eine spezifische Reaktion erreicht werden konnte. Für die Routinediagnose wird es sicher vorteilhaft sein, IBDV und IBV in fixiertem, in Paraffin eingebettetem Material nachweisen zu können. Resumen Se emplearon técnicas de inmunoperoxidasa y de inmunofluorescencia para detectar y localizar virus de infección de la boisa de Fabricio (VIBF) y virus de la bronquitis infecciosa (VBI) en tejidos de pollo fijados en parafina. Se comprobó que una solución modificada de Bouin (9. partes de ácido pécrico al 1% por una parte de formol neutral buferado al 10% y ácido acético al 5%) funcionó como un excelente fijador. Los tejidos fijados en formol neutral buferado al 10% mostraron tener una tinción de fondo muy fuerte en todas las áreas donde el tratemiento con enzima de estos tejidos logró exitosamente exponer los antígenos virales y por lo tanto manifestando una reacción positiva. Para los objetivos de diagnóstico de rutina, demostró tener ventajas para detectar al VIBF y al BVI en material fijado en parafina.