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Reverse transcription-polymerase chain reaction assay for rabies virus detection

2004; UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS; Volume: 56; Issue: 3 Linguagem: Português

10.1590/s0102-09352004000300017

1678-4162

Joeler Vargas Dantas, Leda Maria Silva Kimura, Milene Silveira Ferreira, Alexandre Madi Fialho, M.M.S. Almeida, Cátia Regina Valério Grégio, Phyllis Catharina Romijn, J.P.G. Leite,

Venomous Animal Envenomation and Studies

Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificacao genomica, precedida de transcricao reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteina do virus da raiva, para a utilizacao dessa metodologia em laboratorios onde sao realizadas investigacoes para a deteccao do virus rabico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefalico de animais (44 bovinos, 5 equinos e 1 quiroptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescencia direta e/ou prova biologica para o virus rabico. A extracao do RNA foi feita a partir da suspensao a 10% em PBS pH7,2 do tecido encefalico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificacoes. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biologica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescencia direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensivel, especifica, rapida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratorios que trabalham no diagnostico de virus rabico.