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Die Bestimmung der Molekulargewichtsverteilung von Polymeren durch Permeationschromatographie an porösem Glas, 1. Dextrane bis zu einem Molekulargewicht von 600 000

1976; Wiley; Volume: 177; Issue: 5 Linguagem: Alemão

10.1002/macp.1976.021770521

0025-116X

Arno Max Basedow, Klaus Ebert, Hanns J. Ederer, Hartmuth Hunger,

Protein purification and stability

Abstract Es wird gezeigt, daß durch Permeationschromatographie an porösem Glas Dextrane so gut aufgetrennt werden, daß Molekulargewichtsverteilungen mit hoher Genauigkeit bestimmt werden können. Die Eichkurve wurde mit Hilfe von 15 engverteilten Dextranfraktionen (M̄ w /M̄ n = 1,02–1,15) bestimmt, wobei deren Molekulargewichtsverteilung berücksichtigt wurde. Die Bandenverbreiterungsfunktion wurde mit „monodispersen”︁ Fraktionen über den gesamten Molekulargewichtsbereich experimentell bestimmt. Die Eichfraktionen und die monodispersen Fraktionen wurden durch präparative Gelchromatographie hergestellt. Verschiedene Korrekturverfahren der Bandenverbreiterung wurden angewendet und anhand experimenteller Beispiele geprüft. Da die Bandenverbreiterung bei der verwendeten Versuchsanordnung die Form von Gaußkurven hat, konnten vereinfachte Korrekturverfahren angewendet werden. Die Wahl des optimalen Korrekturverfahrens hängt von der Form der Elutionskurve und der Bandenverbreiterungsfunktion ab. Es wird experimentell gezeigt, daß es selbst für komplizierte Elutionskurven mit mehreren Maxima Verfahren gibt, die sehr gute Ergebnisse liefern.