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Erfahrungen mit fluoreszenzmarkierten Antikörpern bei der routinemäßigen Laboratoriumsdiagnose der Tollwut

2010; Wiley; Volume: 11; Issue: 3 Linguagem: Francês

10.1111/j.1439-0450.1964.tb00245.x

0931-2021

Lothar Schneider,

Microbial infections and disease research

Zusammenfassung Die Tollwutdiagnose mit Hilfe fluoreszierender Antikörper erfordert ein hochwertiges fluoreszenzmarkiertes Tollwutimmunserum. Die Schritte, die zur Markierung und Aufbereitung von in Gesamtserum enthaltenen Tollwutantikörpern führen, sind: die Konjugation, die Entfernung überschüssigen Farbstoffes, sowie Maßnahmen zur Unterdrückung unspezifischer Fluoreszenzerscheinungen. Diese Maßnahmen, sowie die Durchführung des eigentlichen FA-Tests werden ausführlich beschrieben. Die mit einem derartigen fluoreszenzmarkierten Immunserum behandelten tollwutantigenhaltigen Gehirnpräparate enthalten bestimmte, brillant fluoreszierende Aggregate. Ihre Größe, Form und Verteilung in Ausstrichpräparaten bei natürlich infizierten Tieren werden in Text und Bild erläutert. Die verschiedenen Methoden des Spezifitätsnachweises werden eingehend geschildert. Das Problem der sogenannten unspezifischen Anfärbungen wird diskutiert; ihre Ursachen, sowie Maßnahmen zu ihrer Eliminierung werden aufgezeigt. Summary Experiences with fluorescence labelled antibodies in the routine laboratory diagnosis of rabies I. Fluorescent antibody technique The diagnosis of rabies by means of fluorescent antibodies requires a high quality fluorescence-labelled rabies immune serum. Steps which enable labelling and proper treatment of rabies antibodies contained in whole serum, are: conjugation, removal of excess dye, and measures to suppress unspecific fluorescence. These measures as well as the actual FA-test are described in detail. Brain preparations containing rabies virus antigen treated with such a fluorescence-labelled immune serum contain certain brilliantly fluorescing aggregations. Their size, shape and distribution in smears prepared from naturally infected animals is explained and illustrated. The various methods to control the specificity of the test are discussed in detail. The problem of so-called non-specific staining and its causes and methods to eliminate it are described. Résumé Expériences acquises en matière de diagnostic de laboratoire de la rage en recourant aux anticorps marques par fluorescence. 1ère communication: La technique des anticorps fluorescents Le diagnostic de la rage à l'aide des anticorps fluorescents exige que l'on dispose d'un immunsérum de la rage marqué par fluorescence, de haute valeur. Le processus permettant de marquer et de rendre disponibles les anticorps rabiques que contient le sérum sont: la conjugaison, l'éloignement du colorant superflu etles opérations destinées à empêcher les manifestitions de fluorescence aspécifique. Ces opérations ainsi que l'exécution du test «FA» proprement dit sont décrites en détail. Les préparations de matériel encéphalique contenant des antigènes rabiques, traitées avec un tel sérum immun marqué par fluorescence, contiennent des aggrégats déterminés, fluorescents sous forme brillante. Leur grosseur, leur forme et leur répartition dans les frottis préparés à partir de matériel prélevé sur des animaux naturellement infectés, sont décrites et illustrées par l'image. Les différentes méthodes de contrôle de leur spécificité sont rapportées dans le détail. Le problème que constitue la coloration non-spécifique est discuté; ses causes ainsi que les mesures propres à sa suppression sont décrites. Resumen Conocimientos hechos con los anticuerpos marcados con fluorescencia en el diagnóstico rutinario de laboratorio de la rabia Ia comunicación: la técnica de los anticuerpos fluorescentes El diagnóstico de la rabia con ayuda de anticuerpos fluorescentes precisa un suero inmune antirrábico de alta calidad marcado con fluorescencia. Los pasos que conducen al marcaje y elaboracion de anticuerpos contra la rabia contenidos en el suero total son: conjugación, eliminación del colorante sobrante, así como medidas para reprimir los fenómenos de fluorescencia inespecífica. Se describen en detalle estas medidas, a igual que la realización de la prueba propia de anticuerpos fluorescentes. Las preparaciones cerebrales que contienen antígenos de la rabia, tratadas con un suero inmune tal marcado con fluorescencia, contienen ciertos agregados fluorescentes brillantes. Se comentan en texto e imágenes su tamaño, forma y distribución en preparaciones de extensión en animales infectados por vía natural. Se enumeran con prolijidad los diversos métodos de identificación de la especificidad. Discútese el problema de las llamadas coloraciones inespecíficas; señalanse sus causas, así como medidas para su eliminación.