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Züchtung von Schweinepestvirus in Ferkelhodenkulturen mit cytopathogenem Effekt

2010; Wiley; Volume: 13; Issue: 3 Linguagem: Francês

10.1111/j.1439-0450.1966.tb01496.x

0931-2021

H. Mahnel, A. Mayr, B. Bibrack,

Viral Infections and Immunology Research

Zusammenfassung Das Schweinepestvirus ließ sich unter bestimmten Bedingungen in Primärkulturen aus Ferkelhoden mit einem cytopathogenen Effekt anzüchten. Der cytopathogene Effekt begann mit Granulierung, Abkugelung und Vergrößerung der Zellen und führte zu einer Lysis der degenerierten Zellbezirke. Der Erfolg der Anzüchtung war unabhängig vom verwendeten Virusausgangsmaterial. Es ließen sich sowohl Naturstämme (Milzverreibung, virus-haltiges Serum) als auch Kultur- und lapinisierte Stämme mit cytopathogenem Effekt anzüchten. Bei den Naturstämmen benötigte man 8 bis 10, bei den Kulturstämmen 2 bis 4 Passagen bis zur Ausbildung eines cytopathogenen Effektes. Die in Ferkelhoden-Kulturen angezüchteten, cytopathogenen Virusstämme waren für Schweinenieren-Kulturen besonders stark cytopathogen. Die Titer in Schweinenieren-Kulturen lagen etwa eine Zehnerpotenz höher als in den homologen Ferkelhoden-Kulturen. Schweinenieren-Kulturen eigneten sich für Titrierungen und Neutralisationsteste besser als die homologen Ferkelhoden-Kulturen. Die Spezifität der in Ferkelhoden-Kulturen mit einem cytopathogenen Effekt angezüchteten Schweinepeststämme wurde im Tierversuch, im Neutralisationstest und in Zellkultur-Passagen unter Zusatz von Schweineadenovirus-Immunserum gesichert. Summary Multiplication of swine fever virus with cytopathogenic effect in piglet testis culture Swine fever virus could be cultivated under certain conditions in primary cultures of piglet testis and show cytopathogenic effects which began with granulation of the cells, which became spherical and swollen, and finally led to lysis of the degenerated areas. The success of cultivation was independent of the source of the virus material in that one could equally successfully culture natural strains (spleen or serum) as also cultured and lapinised strains. To produce the cytopathogenic effect, natural strains required 8–10 passages and cultured strains only 2–4. Cytopathogenic strains cultured in piglet testis were particularly cytopathogenic in pig kidney cultures in which the titre was about ten times as great as in the homologous piglet testis culture. Pig kidney cultures were better suited than homologous piglet testis cultures for titrations and neutralisation tests. The specificity of swine fever strains with a cytopathogenic effect in testis cultures is demonstrated by animal inoculation neutralisation tests and cell culture passages after the addition of pig adenovirus immune serum. Résumé La multiplication du virus de la peste porcine avec effet cytopathogène dans des cultures de tissu testiculaire de porcelets On réussit à cultiver le virus de la peste porcine dans certaines conditions expérimentales en culture primaire de tissu testiculaire de porcelets. L'effet cytopathogène commençait par une granulation des cellules qui devenaient sphériques et plus volumineuses. Il aboutissait à une lysis des parties dégénérées. La réussite de la culture était indépendante du matériel viral utilisé au départ. On put cultiver aussi bien des souches naturelles (rate, sérum contenant du virus) que des souches de virus en culture ou lapinisé. Avec les souches naturelles, l'effet cytopathogène apparaissait après 8 à 10 passages, avec les souches de culture après 2 à 4 passages. Les souches de virus cytopathogènes cultivées en cultures de testicule de porcelets étaient spécialement cytopathogènes pour les cultures de cellules rénales de porc. Les titres dans les cultures de cellules rénales porcins étaient d'environ une puissance de 10 plus élevés que dans les cultures homologues de cellules testiculaires. Les cultures de cellules rénales porcines sont plus appropriées pour les titrations et les tests de neutralisation que les cultures homologues de cellules testiculaires. La spécificité des souches de virus de la peste porcine cultivées dans les cellules testiculaires de porcelets avec effet cytopathogène fut contrôlée par l'essai sur l'animal, par le test de neutralisation et par des passages sur cultures de tissu après adjonction de sérum contre l'adénovirus porcin. Resumen Cultivo del virus peste porcina en culturas de testículos de lechones con efecto citopatógeno El virus peste porcina se pudo cultivar bajo ciertas condiciones en culturas primarias testículos de lechones con cierto efecto citopatógeno. El efecto citopatógeno comenzó con la granulación, esfericidad y engrandecimiento de las células y condujo a una lisis de las zonas celulares degeneradas. El éxito del cultivo era independiente del material virósico inicial utilizado. Pudiéronse cultivar tanto cepas naturales (trituración de bazo, suero conteniendo virus) como también cepas cultivadas y lapinizadas con efecto citopatógeno. En las cepas naturales se precisaban 8 ó 10 pases, en las cepas culturales de 2 á 4 hasta la presentación del efecto citopatógeno. Las cepas víricas citopatógenas, cultivadas en culturas de testículos de lechones eran extraordinariamente citopatógenas para las culturas de riñones porcinos. Los títulos en las culturas de riñones porcinos eran mayores en una potencia decimal que en las culturas homólogas de testículos de lechones. Las culturas de riñones porcinos resultan más apropiadas para titulaciones y pruebas de neutralización que las culturas homólogas de testículos de lechón. La especificidad de las cepas peste porcina cultivadas en culturas de testículos de lechón con efecto citopatógeno se aseguró en el ensayo con animales, en la prueba de neutralización y en pases por culturas celulares bajo la adición de sueros inmunes de adenovirus porcinos.