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Focus‐Immunoassay for Borna Disease Virus‐Specific Antigens

1984; Wiley; Volume: 31; Issue: 1-10 Linguagem: Inglês

10.1111/j.1439-0450.1984.tb01336.x

0931-2021

Georg Pauli, J. Grunmach, H. Ludwig,

Microbial infections and disease research

Summary Borna Disease virus and its antigens have been assayed by the fluorescence antibody technique. A focus‐immunoassay, termed PELISA, was established. It is based on fixation of the cells with 3% formaldehyde, treatment with 1% Triton X‐100, incubation with antibodies and the corresponding species‐specific antibodies coupled to horseradish peroxidase followed by the enzyme/substrate (3‐amino‐9‐ethyl‐carbazole, H 2 0 2 ) reaction. This assay can be applied to detect antigens. It allows quantitation of virus as well as titration of antibodies. It greatly facilitates studies on Borna Disease virus and its antigens and is approx. 10 to 100‐fold more sensitive than the fluorescence antibody test used previously. Zusammenfassung Focus‐Immuntest zum Nachweis von virus‐spezifischen Antigenen bei der Borna Krankheit Eine Borna Virus Infektion sowie Borna Virus‐spezifische Antigene wurden bisher mittels der Fluoreszenzantikörper‐Technik nachgewiesen. Es wird über einen empfindlichen Focus‐Immuntest, genannt PELISA, berichtet. Er basiert auf der Fixation von Zellen mit 3% Formaldehyd, Behandlung mit 1% Triton X‐100, Inkubation mit Antikörpern und den entsprechenden speziesspezifischen, Peroxidase markierten Antikörpern. Die Antikörperbindung wird durch eine Enzym/Substrat (3‐Amino‐9‐Ethyl‐Carbazol, H 2 0 2 ) Reaktion nachgewiesen. Dieser Test kann zur Antigendarstellung genutzt werden. Er erlaubt die Quantifizierung von Virus ebenso wie die Titration von Antikörpern und ist etwa 10–100fach empfindlicher als der bis jetzt verwendete Fluoreszenzantikörpertest. Untersuchungen am Virus der Borna Krankheit sowie seiner Antigene werden mit diesem Test erheblich vereinfacht. Resumen La prueba inmunitaria focal para los antígenos específicos del virus de la enfermedad de Borna Hasta la fecha se ponían en evidencia una infección por virus Borna y los antígenos específicos del mismo virus mediante la técnica de anticuerpos fluorescentes. Se informa sobre una prueba inmunitaria focal sensible, llamada PELISA. Esta técnica se basa en la fijación de células con un 3% de aldehido metílico, tratamiento con 1% de Triton X‐100, incubación con anticuerpos y con los anticuerpos correspondientes específicos de especie, marcados con peroxidasa de rábano rusticano. La fijación de anticuerpos se pone en evidencia por medio de una reacción de enzima/substrato (3‐amino‐9‐etil‐carbazol, H 2 0 2 ). Esta prueba se puede utilizar para detectar antígenos. Permite cuantificar virus, titular anticuerpos y es de 10–100 veces más sensible que la prueba de anticuerpos fluorescentes que se venía utilizando hasta ahora. Con esta prueba se han simplificado mucho los estudios referentes al virus de la enfermedad de Borna y a sus antígenos.