Produção Nacional
Imunomarcação de APAF-1 em mastocitomas cutâneos caninos (projeto em andamento)
2015; Volume: 13; Issue: 1 Linguagem: Português
ISSN
2596-1306
AutoresC. Barra, Lidia Hildebrand Pulz, Ricardo de Francisco Strefezzi,
Tópico(s)Hedgehog Signaling Pathway Studies
ResumoIntroducao e objetivos: os mastocitomas representam aproximadamente 25% de todas as neoplasias malignas cutâneas em caes. O aspecto macroscopico e o comportamento extremamente variavel destes tumores dificultam a elaboracao de um prognostico preciso e inclusive a prescricao de tratamentos especificos. Sabe-se que o processo de apoptose e um tema indispensavel em oncologia por sua importância no desenvolvimento tumoral e metastatizacao. Alteracoes nesse mecanismo favorecem a progressao tumoral, pois permitem a sobrevivencia das celulas neoplasicas na circulacao e outros microambientes. As proteinas que participam da via intrinseca da apoptose sao indispensaveis nesse processo, como a proteina APAF-1 (fator apoptotico de ativacao de protease 1) que se liga a citocromo C liberada pela mitocondria formando um complexo proteico denominado apoptossomo. Tal complexo contem na sua porcao N terminal um dominio de recrutamento de caspases (CARD), que e responsavel pela interacao com a caspase 9. Uma vez ativada, segue-se o processo que culmina em morte celular. Pela importância desta via apoptotica na progressao tumoral e na morte celular induzida por grande parte dos antineoplasicos utilizados atualmente, as proteinas associadas a apoptose podem ser importantes marcadores prognosticos e preditivos em diversos tumores. O presente trabalho caracterizara a expressao imuno-histoquimica da APAF-1 em mastocitomas cutâneos canino procurando verificar o seu potencial para marcador prognostico nesta neoplasia. Materiais e metodos: cinquenta casos de mastocitomas cutâneos caninos serao processados para histologia de acordo com as tecnicas rotineiras de inclusao em parafina. Os cortes histologicos obtidos serao corados pela hematoxilina e eosina para graduacao das lesoes, e utilizados para processamento imuno-histoquimico. O processamento imuno-histoquimico sera realizado com anticorpo primario anti-APAF-1 (Santa Cruz, SC-7231), na diluicao 1:100, de acordo com as recomendacoes do fabricante. Como controle negativo, SERA utilizado IgG de camundongo em substituicao ao anticorpo primario. A quantificacao das marcacoes sera determinada pela porcentagem de celulas positivas em cinco campos de marcacao intensa (“hot spots”). Os resultados serao comparados a graduacao histopatologica, mortalidade em funcao do tumor e sobrevida. Resultados: Ate o presente foi observada a existencia da expressao citoplasmatica em numero variavel de mastocitos neoplasicos por lesao, com padrao finamente granular. Novas amostras estao sendo processadas para a validacao do protocolo e ampliacao do numero de casos analisados, de modo a viabilizar a quantificacao das marcacoes e a realizacao da analise estatistica.
Referência(s)