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Artigo Produção Nacional

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Bioterápicos de Candida albicans induzem alterações nos índices de adesão e na respiração celular

2013; Associação Paulista de Homeopatia; Volume: 76; Linguagem: Português

0102-227X

Fortune Homsani, Gleyce Moreno Barbosa, Lucas Fernandes, Camila Monteiro Siqueira, Luiz Henrique dos Santos, Paulo Murillo Neufeld, Tatiana El-Bach, André Luis Souza dos Santos, Carla Holandino,

Healthcare Regulation

Introducao: O genero Candida spp e responsavel por cerca de 80% das infeccoes fungicas no ambiente hospitalar e constitui causa relevante de infeccoes sistemicas em pacientes hospitalizados, especialmente em doentes graves e em imunocomprometidos, com predominância da Candida albicans. A adesao das leveduras as celulas epiteliais do hospedeiro e um potente estimulador para a formacao de hifas, forma invasiva do fungo [1]. Os bioterapicos sao medicamentos preparados a partir de produtos biologicos, elaborados conforme a Farmacopeia Homeopatica Brasileira (FHB)[2], indicados para tratamento de infeccoes de etiologia conhecida, empregados com grande sucesso no tratamento clinico destas infeccoes. Os bioterapicos RC, desenvolvidos pelo medico brasileiro Roberto Costa (RC) sao preparados a partir do agente etiologico integro e, segundo suas pesquisas, possuem maior capacidade de estimular o sistema imunologico do hospedeiro [3,4]. Objetivo: Avaliar as possiveis alteracoes induzidas pelo bioterapico de Candida albicans RC nos indices de adesao de Candida albicans frente as celulas Ma104, bem como na respiracao celular. Metodologia: Os bioterapicos de Candida albicans foram preparados nas diluicoes 12d e 30d, conforme tecnica desenvolvida pelo medico brasileiro Roberto Costa, apos previa identificacao do agente etiologico. Para o preparo do bioterapico foi usada uma parte de uma suspensao de C. albicans integra (108 cel/mL) diluida em 9 partes de agua destilada esteril submetida a 100 sucussoes mecânicas. O procedimento foi sucessivamente repetido ate 12d (BIO 12d) e 30d (BIO 30d). Agua 30d, usada como controle, foi preparada da mesma forma. A manipulacao dos bioterapicos envolveu o uso de dois solventes: agua destilada esteril e tampao salina fosfato (PBS). Analise por microscopia eletronica de transmissao e avaliacao da capacidade de formacao de colonias foi utilizada para avaliacao de efeitos dos solventes sobre suspensao de leveduras (107 leveduras/ml) em agua ou em PBS. A quantificacao do indice de adesao de C. albicans marcadas com FITC (isotiocianato de fluoresceina – 0,5mg/ml) as celulas Ma104 pre-tratadas por 24 horas e 18 dias com BIO 12d e BIO 30d, a 10% v/v, foi feita por citometria de fluxo (FACScan). Adicionalmente, as celulas Ma104 (5 x 104 celulas / ml) foram cultivadas em meio de cultura suplementado (DMEM + SFB) e estimuladas com 3 a 4 aliquotas de BIO 12d e BIO 30d. As celulas foram tratadas no minimo 6 vezes (equivalente a 48 horas de tratamento) e no maximo 18 vezes (equivalente a 96 horas de tratamento), sendo avaliados os parâmetros da respiracao por Oxigrafia de Alta Resolucao (Oroboros Oxygraph-O2K)[5], apos cada tratamento especifico. Todas as situacoes experimentais foram comparadas as condicoes controle (celulas tratadas com agua destilada esteril dinamizada e nao dinamizada). Resultados: A analise por microscopia eletronica de transmissao e a avaliacao da capacidade de formacao de colonias indicou que ambos os aspectos nao foram modificados apos a diluicao da suspensao de leveduras em agua ou em PBS. Os ensaios de adesao indicaram diminuicao, em torno de 20%, das taxas de adesao das leveduras as celulas Ma104, apos tratamento por 18 dias. Foi possivel detectar uma tendencia a diminuir a intensidade de fluorescencia em todos os tratamentos realizados. Quanto aos parâmetros da respiracao celular foi observado que celulas tratadas com os bioterapicos tendem a reducao na taxa de consumo de O2 acoplado a sintese de ATP. Conclusao: O uso de agua destilada esteril e de PBS preservou as caracteristicas ultraestruturais e a capacidade de formacao de colonias durante a manipulacao dos bioterapicos de C. albicans. Os resultados obtidos indicam que os bioterapicos modificam tanto as taxas de adesao das leveduras quanto a capacidade respiratoria maxima, nao sendo possivel ainda afirmar se existe correlacao direta entre estas alteracoes celulares.