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Artigo Acesso aberto Produção Nacional Revisado por pares
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Real-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen

2015; UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS; Volume: 67; Issue: 6 Linguagem: Português

10.1590/1678-4162-8038

ISSN

1678-4162

Autores

Valéria Spyridion Moustacas, T.M.A. Silva, É.A. Costa, Luciana Fachini da Costa, Tatiane A. Paíxão, Renato L. Santos,

Tópico(s)

Microbial infections and disease research

Resumo

A epididimite infecciosa ovina e uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de semen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas especie-especificos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensivel, uma vez que a amplificacao de DNA ocorreu com ate 0,2ng de DNA/reacao. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificacao inespecifica foi observada. A aplicabilidade da tecnica em amostras biologicas tambem foi confirmada, pois nao houve perda de eficacia (P>0,05) quando comparada a PCR convencional com amostras de semen e urina de carneiros experimentalmente infectados.

Referência(s)