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Criopreservação de plasma rico em plaquetas

2013; Volume: 11; Issue: 1 Linguagem: Português

2596-1306

Liomara Andressa do Amaral Kwirant, F. D. de la Côrte, K.E. Brass, Mara Iolanda Batistella Rubin, Raqueli Teresinha França, Mario Cocco, P.S. Vieira,

Physical Education and Gymnastics

O plasma rico em plaquetas (PRP) vem sendo muito utilizado na medicina equina, mas precisa ser preparado no momento de cada aplicacao, devido a curta durabilidade das plaquetas. Normalmente os tratamentos envolvem varias aplicacoes locais do PRP, motivo pelo qual a possibilidade de armazenar o PRP e preservar suas propriedades seria muito importante. O DMSO e considerado o crioprotetor mais indicado para armazenar plaquetas humanas. O objetivo deste estudo foi testar a eficacia de um protocolo de criopreservacao do PRP equino, utilizando DMSO como crioprotetor. O PRP foi preparado atraves de dupla centrifugacao do sangue coletado de oito poneis sadios. Uma amostra do sangue total foi enviada ao laboratorio para contagem de plaquetas e determinacao do volume plaquetario medio (VPM). Depois de obtido, o PRP foi separado em tres aliquotas, sendo uma o PRP fresco, e as outras duas destinadas a criopreservacao. A amostra fresca foi enviada ao laboratorio para contagem, determinacao do VPM e avaliacao morfologica das plaquetas (inativas, ativadas, estado incerto). Uma das amostras foi congelada com DMSO, na concentracao final de 6% e a outra foi congelada sem DMSO. As amostras foram armazenadas em freezer, a -80°C, por 14 dias, quando foram descongeladas em banho-maria e novamente avaliadas. O PRP fresco apresentou 830 (±95,27) x103 plaquetas/ μL, VPM de 5,1 (±0,06)fL e 4,37% de plaquetas ativadas Quando armazenadas a baixas temperaturas, as plaquetas sofrem processo de ativacao, o que implica em aumento do VPM e alteracoes morfologicas, como mudanca da forma discoide para esferica e emissao de pseudopodes. A avaliacao morfologica e uma maneira de determinar a qualidade das plaquetas apos o congelamento. Nao se observou diferenca no numero total de plaquetas, VPM e plaquetas ativadas entre as amostras frescas e as congeladas com DMSO (617,9±65,49x103 plaquetas/μL; VPM 5,3±0,06fL; 9,6% de plaquetas ativadas). Entretanto, as amostras sem DMSO apresentaram um numero menor de plaquetas (519,6±66,08 x103/μL), maior VPM (5,71±0,08fL) e maior percentagem de plaquetas ativadas (13,87%) (p<0,05), o que indica que quando congeladas sem crioprotetor, as plaquetas sofreram lesoes pelo armazenamento. A criopreservacao a -80°C, utilizando-se DMSO a 6% como crioprotetor, foi eficaz no armazenamento do PRP equino.