Produção Nacional
Crystallization and Crystallographic Analyses of Triosephosphate Isomerase from Naegleria gruberi
2016; Brazilian Society of Chemistry; Volume: 8; Issue: 6 Linguagem: Português
10.21577/1984-6835.20160123
ISSN1984-6835
AutoresRenato Ferras Penteado, Viviane Paula Martini, J. Iulek,
Tópico(s)Protein Structure and Dynamics
ResumoCristalização e Análises Cristalográficas da Triose Fosfato Isomerase de Naegleria gruberiResumo: A enzima Triose fosfato isomerase de Naegleria gruberi (NgTIM) participa da via glicolítica, na qual atua na conversão de dihidroxiacetona fosfato em D-gliceraldeído-3-fosfato. Atualmente, a TIM mais semelhante com estrutura 3D relatada é a da planta Arabidopsis thaliana, que possui 58% de identidade sequencial com a NgTIM.A proteína recombinante NgTIM foi expressa em E. coli BL21(DE3), purificada por cromatografias de afinidade e exclusão de tamanho e cristalizada pelo método de difusão de vapor.Os melhores cristais foram obtidos em 3 diferentes condições, sendo aquele que proveu o melhor conjunto de dados em etanol 15% (V/V) e propoxilato pentaeritrol 40% (V/V).Dados de difração de raios X foram coletados para este cristal a 2,64 Å de resolução e processados.Ele pertence ao grupo de espaço P4 1 22 e têm parâmetros de cela unitária a = 79,70, c = 98,11 Å.A unidade assimétrica contém um monômero, com V M de 2,68 Å 3 Da -1 e um conteúdo de solvente de 54,2 %.
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