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Recherches biochimiques sur l'oogenèse

1972; Elsevier BV; Volume: 54; Issue: 9 Linguagem: Francês

10.1016/s0300-9084(72)80023-3

1638-6183

Herman Denis, Maurice Wegnez, Robert Willem,

Identification and Quantification in Food

5 S RNA from oocytes of Xenopus laevis differs from somatic 5 S RNA by the degree of phosphorylation of its 5′-end. There is in somatic 5 S RNA a higher proportion of molecules carrying 2 or 3 phosphate groups on the 5′-terminal nucleotide. Somatic 5 S RNA was retarded by columns of Sephadex G-100 slightly less than oocyte 5 S RNA. 5 S RNA from somatic ribosomes was eluted from columns of methylated albumin-Kieselguhr far behind 5 S RNA from whole oocytes and from oocyte ribosomes. Ribosomes from early embryos were found to contain 2 types of 5 S RNA: [1] newly made 5 S RNA which is of somatic type and [2] bulk 5 S RNA which is of the oocyte type. Somatic 5 S RNA migrated in 7.4 p. cent polyacrylamide gels slightly ahead of oocyte 5 S RNA. This difference of electrophoretic mobility was suppressed neither by removal of the terminal phosphates by alkaline phosphatase nor by heat or urea denaturation. Electrophoresis in 12.3 p. cent gels revealed the existence of 2 distinct forms in somatic 5 S RNA. One of these had the same mobility as oocyte 5 S RNA. The other one migrated faster. Somatic and oocyte 5 S RNA's reacted differently to heat denaturation: after cooling both native forms of somatic 5 S RNA were replaced by a third one, which migrated faster, whereas most of the oocyte RNA remained in native form. When heated in saline, oocyte 5 S RNA showed a slightly higher hyperchromicity than somatic 5 S RNA. These results suggest that both the primary and the secondary structures are different in somatic and in oocyte 5 S RNA's. Le RNA 5 S des oocytes de Xenopus laevis diffère du RNA 5 S somatique par le degré de phosphorylation de son extrémité 5′: le RNA 5 S somatique contient une plus forte proportion de molécules portant 2 ou 3 groupes phosphates sur leur nucléotide 5′-terminal. Le RNA 5 S somatique est retardé par le Sephadex G-100 un peu moins que le RNA 5 S d'oocytes. Le RNA 5 S provenant de ribosomes somatiques est élué de l'albumine méthylée bien après le RNA 5 S d'oocytes entiers et de ribosomes d'oocytes. Les ribosomes des jeunes embryons contiennent deux types de RNA 5 S. Celui qui est synthétisé après la fécondation est de type somatique et ne représente qu'une faible proportion du RNA 5 S total. Le restant du RNA 5 S embryonnaire se trouve dans des ribosomes assemblés au cours de l'oogenèse. Le RNA 5 S somatique migre dans les gels de polyacrylamide à 7,4 p. cent un peu plus vite que le RNA 5 S d'oocytes. Ni l'enlèvement des groupes phosphates terminaux au moyen de la phosphatase alcaline, ni la dénaturation par la chaleur ou l'urée ne suppriment cette différence de mobilité. L'électrophorèse en gel de polyacrylamide à 12,3 p. cent révèle l'existence de deux formes distinctes de RNA 5 S somatique. L'une d'entre elles a la même mobilité que le RNA 5 S d'oocytes. L'autre forme migre plus vite. Le RNA 5 S d'oocytes et le RNA 5 S somatique réagissent différemment à la dénaturation thermique: la plus grande partie du RNA 5 S d'oocytes conserve, après refroidissement, la même mobilité qu'avant, tandis que le RNA 5 S somatique adopte une forme nouvelle, qui migre plus vite que toutes les autres. Quand on le chauffe en solution saline, le RNA 5 S d'oocytes présente une hyperchromicité un peu plus forte que le RNA 5 S somatique. Ces résultats suggèrent que le RNA 5 S somatique et le RNA 5 S d'oocytes possèdent à la fois une structure primaire et une structure secondaire différentes. Die RNS der Oozyten des Xenopus laevis unterscheidet sich von der somatischen 5 S RNS durch den Phosphorylationsgrad ihres 5′ Endes: die somatische 5 S RNS enthält einen stärkeren Anteil von Molekülen, die 2 oder 3 Phosphatgruppen auf ihrem 5′-Endnukleotid tragen. Die 5 S RNS der Oozyten wird durch Sephadex G-100 ein wenig stärker zurückgehalten als die somatische 5 S RNS. Die aus den somatischen Ribosomen stammende 5 S RNS wird aus einer Säule methylierten Albumin - Kieselgurs wesentlich später eluiert als 5 S RNS der ganzen Oozyten und der Ribosomen der Oozyten. Die Ribosomen der jungen Embryos enthalten zwei Typen der 5 S RNS. Die eine wird nach der Befruchtung synthetisiert, sie ist vom somatischen Typ und stellt nur einen schwachen Anteil der gesamten 5 S RNS dar. Die übrige 5 S RNS des Embryos befindet sich in den Ribosomen, die sich zum Zeitpunkt der Oogenese verbinden. Die somatische 5 S RNS wandert in Polyacrylamidgel bei 7,4 p. cent schneller als die 5 S RNS der Oozyten. Diese elektrophoretische Beweglichkeit wird weder durch Abtrennung der Phosphatendgruppen mittels der alkalischen Phosphatase noch durch Denaturierung durch Wärme oder Harnstoff beeinträchtigt. Die Elektrophorese in Polyacrylamidgel bei 12,3 p. cent enthüllt die Existenz zweier unterschiedlicher Formen der somatischen 5 S RNS. Die eine davon hat dieselbe Beweglichkeit wie die 5 S RNS der Oozyten. Die andere Form wandert wesentlich schneller. Die 5 S RNS der Oozyten und die somatische 5 S RNS reagieren in verschiedener Weise auf thermische Denaturierung: der grösste Teil der 5 S RNS der Oozyten behält nach Abkühlung dieselbe Beweglichkeit wie zuvor während die somatische 5 S RNS eine neue Form annimmt, die schneller als alle anderen wandert. Bei Erwärmung in Salzlösung zeigt die 5 S RNS eine stärkere Hyperchromizität als die somatische 5 S RNS. Die Ergebnisse legen es nahe, dass die somatische 5 S RNS und die 5 S RNS der Oozyten zugleich eine unterschiedliche primäre und sekundäre Struktur aufweisen.