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Antibacterial effect of N ‐acetylcysteine in combination with antimicrobials on common canine otitis externa bacterial isolates

2019; Wiley; Volume: 30; Issue: 6 Linguagem: Inglês

10.1111/vde.12795

1365-3164

Elizabeth R. May, Brette E. Ratliff, David A. Bemis,

Antimicrobial Resistance in Staphylococcus

Approved treatments for canine otitis externa are limited in variety and may contain ototoxic ingredients. With bacterial resistance an ongoing concern, it would be ideal if non-ototoxic agents combined with antibiotics resulted in a synergistic effect, requiring lower antibiotic concentrations to treat infections. Evidence of synergism and antagonism between N-acetylcysteine (NAC) and various antibiotic classes has been reported; the present research group was interested in examining these interactions.To determine if NAC, an otoprotective and antimicrobial compound, has synergistic activity when combined with enrofloxacin or gentamicin in vitro against bacterial isolates causing canine otitis externa.Twenty-two isolates from canine clinical cases of otitis externa were identified and tested, including seven Staphylococcus pseudintermedius, 12 Pseudomonas aeruginosa and three Corynebacterium spp. isolates.Each isolate was grown on blood agar for 24 h and transferred to Mueller-Hinton broth (MHB), with a final concentration of 5 × 105 cfu/mL. Each well was inoculated with 50 μL of bacterial suspension. N-acetylcysteine was diluted in MHB to a starting concentration of 160 mg/mL. Enrofloxacin and gentamicin were diluted to 64 μg/mL. Individual and checkerboard serial microdilution assays were performed in triplicate with negative controls for all isolates tested.Interactions observed for NAC and enrofloxacin were synergistic (4.5%), indifferent (77.3%) or antagonistic (18.2%). Interactions observed for NAC and gentamicin were synergistic (4.5%), indifferent (45.5%) or antagonistic (50%).Most interactions between NAC and enrofloxacin or gentamicin were indifferent or antagonistic at the concentrations tested in vitro.Les traitements autorisés pour les otites canines sont limités en variété et peuvent contenir des composés ototoxiques. Avec la problématique des résistances bactériennes, il serait idéal que des agents non-ototoxiques combinés aux antibiotiques de façon synergique, nécessitant des concentrations antibiotiques plus faibles pour traiter les infections. Des preuves de synergie et d'antagonisme entre le NAC (N-acetylcystéine) et les classes antibiotiques variées ont été rapportées; notre groupe de recherche s'est intéressé à ces interactions. HYPOTHÈSES/OBJECTIFS: Déterminer si NAC, un composé antimicrobien et otoprotecteur, a une activité synergique quand il est associé à l'enrofloxacine ou à la gentamycine in vitro contre les souches bactériennes causant les otites externes canines.Vingt deux souches de cas cliniques d'otite externe canine ont été identifiées et testées, comprenant sept souches de Staphylococcus pseudintermedius, 12 Pseudomonas aeruginosa et trois Corynebacterium spp. MATÉRIEL ET MÉTHODE: Chaque souche a été isolée sur gélose d'agar pendant 24h et transféré sur MHB (Mueller-Hinton broth) avec une concentration finale de 5 x 105 cfu/mL. Chaque inoculation a été réalisée avec une suspension bactérienne de 50 μL. La N-acetylcystéine était diluée dans MBH à une concentration initiale de 160 mg/mL. L'enrofloxacine et la gentamycine étaient diluées à 64 μg/mL. Les tests de microdilution individuels et en série ont été réalisés trois fois avec contrôles négatifs pour toutes les souches testées. RÉSULTATS: Le interactions observées pour NAC et enrofloxacine étaient synergiques (4,5%), indifférentes (77,3%) ou antagonistes (18,2%). Les interactions observées pour NAC et gentamycine étaient synergiques (4,5%), indifférents (45,5%) ou antagonistes (50%).La plupart des interactions entre NAC et enrofloxacine ou gentamycine étaient indifférentes ou antagonistes aux concentrations testées in vitro.INTRODUCCIÓN: los tratamientos aprobados para la otitis externa canina son limitados y pueden contener ingredientes ototóxicos. Con la resistencia bacteriana como una preocupación constante, sería ideal si los agentes no ototóxicos combinados con antibióticos produjeran un efecto sinérgico, requiriendo concentraciones más bajas de antibióticos para tratar infecciones. Se ha publicado evidencia de actividad sinérgica y antagonismo entre la N-acetilcisteína (NAC) y varias clases de antibióticos; este grupo de investigación estaba interesado en examinar estas interacciones. HIPÓTESIS/OBJETIVOS: determinar si NAC, un compuesto otoprotector y antimicrobiano, tiene actividad sinérgica cuando se combina con enrofloxacina o gentamicina in vitro frente a aislados bacterianos que causan otitis externa canina. ANIMALES: se identificaron y evaluaron 22 aislados de casos clínicos caninos de otitis externa, incluidos siete aislados de Staphylococcus pseudintermedius, 12 de Pseudomonas aeruginosa y tres de Corynebacterium spp. MÉTODOS Y MATERIALES: cada aislamiento se cultivó en agar sangre durante 24 h y se transfirió a caldo Mueller-Hinton (MHB), con una concentración final de 5 x 105 ufc/ml. Cada pocillo se inoculó con 50 μl de suspensión bacteriana. La N-acetilcisteína se diluyó en MHB a una concentración inicial de 160 mg/ml. Enrofloxacina y gentamicina se diluyeron a 64 μg/ml. Se realizaron ensayos de microdilución en serie individuales y de tablero de ajedrez por triplicado con controles negativos para todos los aislamientos probados. RESULTADOS: las interacciones observadas para NAC y enrofloxacina fueron sinérgicas (4,5%), indiferentes (77,3%) o antagonistas (18,2%). Las interacciones observadas para NAC y gentamicina fueron sinérgicas (4,5%), indiferentes (45,5%) o antagónicas (50%). CONCLUSIONES Y RELEVANCIA CLÍNICA: la mayoría de las interacciones entre NAC y enrofloxacina o gentamicina fueron indiferentes o antagonistas a las concentraciones probadas in vitro.Die Vielfalt an zugelassenen Behandlungen für die Otitis externa des Hundes ist limitiert und kann ototoxische Bestandteile enthalten. Da die bakterielle Resistenz eine zunehmende Sorge darstellt, wäre es ideal, wenn nicht-ototoxische Inhaltsstoffe in Kombination mit Antibiotika einen synergistischen Effekt hätten, wodurch geringere antibiotische Konzentrationen zur Behandlung der Infektionen nötig wären. Es gibt publizierte Evidenz von Synergismus und Antagonismus zwischen N-acetylcystein (NAC) und verschiedenen Antibiotikaklassen; diese Forschungsgruppe war an diesen Interaktionen interessiert.Das Ziel war es festzustellen, ob NAC, ein otoprotektiver und antimikrobieller Inhaltsstoff, in vitro eine synergistische Aktivität in Kombination mit Enrofloxacin oder Gentamycin gegenüber bakteriellen Isolaten, die eine Otitis externa verursachen, zeigt.Zweiundzwanzig Isolate von klinischen Fällen von Hunden mit einer Otitis externa wurden identifizert und getestet, darunter befanden sich sieben Staphylococcus pseudintermedius, 12 Pseudomonas aeruginosa und drei Corynebacterium spp. Isolate.Jedes Isolat wurde auf Blutagar 24h lang bebrütet und in eine Mueller-Hinton Brühe (MHB) mit einer Endkonzentration von 5 x 105 cfu/mL transferiert. Jedes Röhrchen wurde mit 50 μL der bakteriellen Suspension inokuliert. N-Acetylcystein wurde in MHB auf eine Startkonzentration von 160 mg/mL verdünnt. Enrofloxacin und Gentamicin wurden auf 64 μg/mL verdünnt. Individuelle und Checkerboard Serien-Mikrodilutionsassays wurden im Triplikat durchgeführt; für alle getesteten Isolate gab es Negativkontrollen.Die Interaktionen zwischen NAC und Enrofloxacin waren synergistisch (4,5%), indifferent (77,3%) oder antagonistisch (18,2%). Interaktionen, die bei NAC und Gentamicin beobachtet wurden, waren synergistisch (4,5%), indifferent (45,5%) oder antagonistisch (50%).Die meisten Interaktionen zwischen NAC und Enrofloxacin oder Gentamicicn waren bei den in vitro getesteten Konzentrationen indifferent oder antagonistisch.背景: 犬外耳炎に対し承認された治療法は限定されており、耳毒性成分が含まれている可能性がある。細菌耐性は継続的な懸念事項であるため、抗生物質と組み合わせた非耳毒性薬が相乗効果をもたらし、感染症治療により低濃度の抗生物質を要するのであれば理想的である。 N-アセチルシステイン(NAC)とさまざまな抗生物質クラスとの相乗作用および拮抗作用のエビデンスが報告されている。現在の研究グループは、これらの相互作用の調査に関心を持った。 仮説/目的: 本研究の目的は、耳保護および抗菌化合物であるNACが、in vitroにおいてエンロフロキサシンまたはゲンタマイシンとで併用した際に犬の外耳炎を引き起こす細菌分離株に対して、相乗作用を有するかどうかを判断することである。 被験動物: S. pseudintermedius7株、緑膿菌12株およびコリネバクテリウム属3株を含む、犬外耳炎臨床例から分離された22株を同定し、試験に供した。 材料と方法: 各分離株を血液寒天培地上で24時間培養し、ミューラーヒントンブロス(MHB)に継代し、最終濃度を5 x 105 cfu / mLに調整した。各ウェルに50 μLの細菌懸濁液を接種した。 N-アセチルシステインをMHBで開始濃度160 mg / mLに希釈した。エンロフロキサシンおよびゲンタマイシンは、64 μg / mLに希釈した。個々およびチェッカーボードの連続微量希釈アッセイは、試験したすべての分離株においてネガティブコントロールを用いて3回実施された。 結果: NACおよびエンロフロキサシンにおいて観察された相互作用は、相乗作用(4.5%)、無作用(77.3%)、または拮抗作用(18.2%)であった。 NACおよびゲンタマイシンにおいて観察された相互作用は、相乗作用(4.5%)、無作用(45.5%)、または拮抗作用(50%)であった。 結論と臨床的関連性: NACとエンロフロキサシンまたはゲンタマイシンとの相互作用のほとんどは、in vitroで試験した濃度においては無作用または拮抗作用を示した。.背景: 治疗犬外耳炎有批号的药物种类有限,并可能含有耳毒性成分。由于细菌的耐药性一直受到关注,如果非耳毒性药物与抗生素联用产生协同作用,从而降低治疗感染所需的抗生素浓度,这将是一个理想结果。已有文献报道N-乙酰半胱氨酸(NAC)与各类抗生素之间的协同作用和拮抗作用; 我们的研究小组对这些相互作用很感兴趣。 假设/目的: NAC 是一种耳保护和抗微生物化合物,在体外与恩诺沙星或庆大霉素联用,确认其对抗引起犬外耳炎的菌株是否具有协同作用。 动物: 共鉴定并测试了犬外耳炎病例的22个临床分离株,包括7株假中间型葡萄球菌、12株铜绿假单胞菌和3株棒状杆菌。 方法和材料: 每种分离株在血琼脂上生长24小时,并转移至Mueller-Hinton肉汤(MHB),终浓度为5×10 5 cfu / mL。每孔接种50μL菌悬液, 将N-乙酰半胱氨酸在MHB中稀释,起始浓度160mg / mL。将恩诺沙星和庆大霉素稀释至64μg/ mL。对所有分离株重复进行三次单独或棋盘式微量稀释试验,设立阴性对照。 结果: NAC和恩诺沙星联用,观察到4.5%协同、77.3%无差异和18.2%拮抗。NAC和庆大霉素联用,4.5%协同、45.5%无差异和50%拮抗。 结论和临床相关性: 在体外试验的浓度下,NAC与恩诺沙星或庆大霉素之间的相互作用大多数无差异或拮抗。.Tratamentos otológicos aprovados para otite externa canina são limitados em variedade e podem conter ingredientes ototóxicos. Considerando que a resistência a antimicrobianos atualmente é um preocupação constante, seria ideal que ativos não ototóxicos associados a antibióticos possuíssem efeitos sinérgicos, demandando concentrações mais baixas de antibióticos para tratar infecções. Evidências de sinergismo entre N-acetilcisteína (NAC) e várias classes de antibióticos tem sido reportadas; o presente grupo de pesquisa teve o interesse de examinar estas interações. HIPÓTESE/OBJETIVOS: Determinar se NAC, um composto antimicrobiano e otoprotetor, possuía ação sinérgica quando associado à enrofloxacina e à gentamicina in vitro contra isolados bacterianos causadores de otite externa.Vinte e dois isolados de casos clínicos de otite externa canina foram identificados e testados, incluindo sete isolados Staphylococcus pseudintermedius, 12 Pseudomonas aeruginosa e três Corynebacterium spp. MÉTODOS E MATERIAIS: Cada isolado foi cultivado em ágar sangue por 24 h e transferidos para caldo Mueller-Hinton (MHB), com uma concentração final de 5 x 105 ufc/mL. Cada poço foi inoculado com uma suspensão bacteriana de 50 μL. A N-acetilcisteína foi diluída no MHB em uma concentração inicial de 160 mg/mL. A enrofloxacina e a gentamicina foram diluídas a 64 μg/mL. Ensaios de microdiluição individuais e checkerboard foram realizados em triplicata com controles negativos para todos os isolados testados.As interações observadas para NAC e enrofloxacina foram sinérgicas (4,5%), indiferentes (77,3%) e antagonistas (18,2%). As interações observadas entre NAC e gentamicina foram sinérgicas(4,5%), indiferentes (45,5%) e antagonistas (50%). CONCLUSÕES E IMPORTÂNCIA CLÍNICA: A maioria das interações entre NAC e enrofloxacina ou gentamicina foram indiferentes ou antagonistas nas concentrações testadas in vitro.