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Avaliação in vitro de arcabouço de PLDLA-TMC com células mesenquimais para a diferenciação em osteoblastos

2019; PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE SÃO PAULO; Volume: 21; Linguagem: Português

1984-4840

Eliana Aparecida de Rezende Duek, Isabela Machado Rondelo, Hellena Maria Queiroz Villas Boas, Jéssica Asami, Moema de Alencar Hausen, Daniel Komatsu,

Dental Implant Techniques and Outcomes

INTRODUCAO : O crescimento osseo, em decorrencia de fraturas, e acelerado atraves do uso de enxertos osseos autogenos ou alogenicos. O primeiro e materialmente limitado e causa morbidade e irregularidades de contorno, e o segundo, esta refem de respostas imunes mediadas por celulas. Dessa forma, estudos com biomaterias, em especial os polimeros sinteticos, aptos para implantes osseos, sao alvos da engenharia de tecidos. Entre eles esta o biomaterial Poli(Lco-D,L acido latico-co-Trimetileno Carbonato), PLDLA-TMC, que apresenta algumas particularidades vantajosas para area medica, como o fato de ser um arcabouco poroso, com a possibilidade de induzir a diferenciacao osteogenica a partir de celulas mesenquimais. OBJETIVOS : Avaliar os efeitos do arcabouco PLDLA-TMC sobre a viabilidade da cultura de celulas mesenquimais e na diferenciacao osteoblastica. METODOS : O PLDLA-TMC foi sintetizado em forma de arcaboucos porosos 3D de 8mm de diâmetro, utilizados para a proliferacao e diferenciacao osteoblastica de celulas-tronco mesenquimais (CTMs), oriundas da medula ossea de ratos Wistar. As celulas foram cultivadas em meio osteogenico e meio DMEM por 21 dias, sendo fixadas e marcadas com Calcein Green (CG), Osteopontina (OPN), Osteocalcina (OCN), Fluoroshield-Dapi (DAPI) e Faloidina. Tanto a OPN como a OCN foram conjugadas com AlexaFlour 647. Apos esse processo, todas as amostras, submetidas ou nao a diferenciacao celular, foram analisadas no Microscopio Confocal de Varredura a Laser (MCVL). RESULTADOS : 21 dias apos o inicio do processo de inducao osteogenica, observou-se a presenca de matriz extracelular difusa, e as celulas apresentaram-se aderidas ao arcabouco de PLDLA-TMC, com alta expressao de calcio, OPN e OCN, alem de quantidade superior de celulas viaveis quando comparada a cultura celular em laminula. A analise ao MCVL da marcacao com OPN revelou que mesmo na ausencia do meio indutor de diferenciacao, o arcabouco de PLDLA-TMC induziu as CTMs a diferenciacao osteoblastica e propiciou um ambiente favoravel a vitalidade e proliferacao dessas celulas. CONCLUSAO : O estudo possibilitou aventar a importância futura da utilizacao dos arcaboucos em implantes in vivo, com intuito de auxiliar o processo de regeneracao ossea, em razao do potencial de inducao osteogenica e das caracteristicas que conferem ao PLDLA-TMC o titulo de biomaterial.