Produção Nacional
Revisado por pares
Expressão e caracterização da glicoproteína D do herpesvírus equídeo 1 em Pichia pastoris
2020; UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS; Volume: 72; Issue: 3 Linguagem: Português
10.1590/1678-4162-11356
ISSN1678-4162
AutoresPaulo Ricardo Centeno Rodrigues, Rodrigo Casquero Cunha, Francisco Denis Souza Santos, Vitória Sequeira Gonçalves, Pedro Machado Medeiros de Albuquerque, Alceu Gonçalves dos Santos, Marcelo de Lima, Fábio Pereira Leivas Leite,
Tópico(s)Toxoplasma gondii Research Studies
ResumoRESUMO O herpesvírus equídeo 1 (EHV-1) apresenta distribuição mundial e causa graves prejuízos à equideocultura. É agente de surtos de doença respiratória, reprodutiva e neurológica, em equídeos jovens e adultos. A glicoproteína D (gD) do envelope viral é essencial para ligação e penetração em células permissivas e direcionamento do sistema imunológico do hospedeiro, induz respostas imunes humorais e celulares, sendo um antígeno apropriado para ser utilizado em vacinas e imunodiagnóstico. O objetivo deste trabalho foi expressar e caracterizar a gD do EHV-1 em Pichia pastoris para posterior utilização como antígeno em técnicas de imunodiagnóstico e formulação de vacinas recombinantes. Uma sequência de DNA que codifica uma forma truncada da gDEHV-1 foi clonada no vetor pPICZαA de expressão em P. pastoris. Obteve-se uma proteína de ~41 kDa, como esperado. A proteína apresentou glicosilação entre 4 kDa e 16 kDa, demonstrada por deglicosilação enzimática. A proteína recombinante foi caracterizada antigenicamente e imunogenicamente por Western blot, utilizando-se anticorpos policlonais equinos anti-EHV-1, e por ELISA indireto em modelo murino, demonstrando que a gD recombinante manteve epítopos similares aos da proteína nativa. Esses resultados sugerem que a gDEHV-1 é um antígeno promissor para uso como imunobiológico no controle do EHV-1.
Referência(s)