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Transformación de hongos fitopatógenos Sclerotium cepivorum Berk mediante fusión de protoplastos

2012; National Institute of Forestry, Agriculture and Livestock Research ( INIFAP ); Volume: 3; Issue: 7 Linguagem: Espanhol

2007-9230

Gerardo Acosta García, Miguel Angel Pantoja Hernández, Claudia Ivonne Muñoz Sánchez, Cristina Pérez Pérez, Ramón Gerardo Guevara-González, Irineo Torres‐Pacheco, Felipe Delgadillo Sánchez, Mario Martín González-Chavira, Lorenzo Guevara Olvera,

Plant tissue culture and regeneration

La pudricion blanca, una de las enfermedades mas preocupantes para los productores de ajo (Allium sativum), es causada por el hongo fitopatogeno Sclerotium cepivorum Berk. Con el fin de desarrollar procedimientos de biologia molecular para el hongo, en este trabajo se describe un metodo de transformacion empleando fusion de protoplastos en presencia de polietilenglicol 3350 (PEG). Se empleo el plasmido pAN7-1 que confiere resistencia a higromicina B, el cual contiene el gen higromicina fosfotransferasa B (hph) de Escherichia coli bajo el promotor gliceraldehido fosfato deshidrogenasa (gpdA) y el terminador antranilato sintetasa (trpC) del hongo filamentoso Aspergillus nidulans. Las transformantes recuperadas en el medio de cultivo de regeneracion papa dextrosa agar-sorbitol (PDA-S) en presencia de 200 (μmL-1 de higromicina B se analizaron amplificando un fragmento del gen bacteriano hph mediante PCR con oligonucleotidos especificos: Hig 1, Sentido 5' GAC CTG CTG AGG TCC CTC 3' y Hig 2, antisentido 5' GCC CTC GGA CGA GTG CTG 3'. Se obtuvieron frecuencias de 12-18 transformantes de S. cepivorum por μg de ADN vector. Los resultados descritos en el presente trabajo contribuiran en la caracterizacion molecular de genes involucrados en el fenomeno de patogenesis de S. cepivorum sobre el ajo