Resumos de Dissertações de Mestrado e Teses de Doutorado apresentadas na Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - USP de julho a setembro de 2012
2012; UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO; Volume: 45; Issue: 4 Linguagem: Português
10.11606/issn.2176-7262.v45i4p466-502
ISSN2176-7262
Autores Tópico(s)Science and Education Research
ResumoToxoplasma gondii, como outros parasitos do Filo Apicomplexa, invadem ativamente as células do hospedeiro num processo, criticamente, dependente das proteínas de micronema (MICs).Proteína de micronema 1 (TgMIC1), 4 (TgMIC4) e 6 (TgMIC6) formam um complexo sobre a superfície celular, capaz de se ligar à célula hospedeira através de TgMIC1, uma adesina ligante de ácido siálico e TgMIC4, ligante de glicanas terminadas em galactose.Nosso grupo já havia revelado que a imunização com o complexo Lac+ (formado por TgMIC1 e TgMIC4) confere resistência contra o parasito.Entretanto, os mecanismos pelos quais essas proteínas ativam o sistema imune não são conhecidos.Nós objetivamos estudar se os efeitos desencadeados pelas proteínas de micronemas em células do sistema imune inato são mediados pela ativação de receptores do tipo toll.A produção de TgMIC1 e TgMIC4 recombinantes viabilizou a elucidação de atividades exercidas pelas MICs em células do sistema imune inato.A elevada produção de citocinas pró-inflamatórias e o padrão de ativação dessas células sugeriram que a resposta ao estímulo com as proteínas de micronemas dependesse de sua interação com receptores da superfície de APCs como TLR-2 e TLR-4.A interação foi determinada pelo uso de células HEK293 transfectadas com TLR-4 ou TLR-2 (homodímero ou heterodímeros TLR2/1 ou TLR2/6), em associação, ou não, com correceptores CD14 e CD36.Ativação de NFkB e produção de IL-8 foram usados como parâmetros para a detecção da ativação celular.Mostramos que tanto TgMIC1 como TgMIC4 de T. gondii ativam TLR-2/1, TLR-2/6 e TLR-4.Em ensaios, utilizando macrófagos de camundongos nocautes para MyD88, TLR-2 e TLR-4, mostramos que a produção de citocinas pró-inflamatórias foi reduzida em células MyD88 -/-, TLR-2 -/e TLR-4 -/-.Investigamos ainda se a natureza lectínica de TgMIC1 e TgMIC4 seria responsável pela ligação a TLRs, através de ensaios com TLR-2 mutados em seus sítios de N-glicosilação; TgMIC1, mas não TgMIC4 , liga-se a N-glicanos de TLR-2.Estudos futuros são necessários para detalhar as interações estabelecidas por TgMIC4 e o seu glicoalvo em moléculas TLRs.Assim, em acréscimo à função de adesão, atribuímos a TgMIC1 e TgMIC4 o papel de interagir com TLRs e iniciar a ativação
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