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Artigo Acesso aberto Produção Nacional Revisado por pares
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Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial

2006; UNIVERSIDADE EST.PAULISTA JÚLIO DE MESQUITA FILHO; Volume: 31; Issue: 1 Linguagem: Português

10.26850/1678-4618eqj.v31.1.2006.p63-72

ISSN

1678-4618

Autores

Thalita B. Zanoni, Iracilda Zeppone Carlos, João Olímpio Tognolli, Hideko Yamanaka, Antonio Aparecido Pupim Ferreira,

Tópico(s)

Trypanosoma species research and implications

Resumo

A doença de Chagas é causada pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) e a detecção de anti-corpos anti-T. cruzi no soro é um método para diagnosticar a doença. Neste trabalho, ELISA indi-reto foi otimizado para a detecção de anticorpos no soro de pacientes com doença de Chagasempregando a proteína Tc85-11 (Ag) da superfície do parasita tripomastigota. Na otimização dascondições experimentais foi aplicado planejamento fatorial completo para os parâmetros tempode incubação, diluições do Ag (0,08 mg mL -1 ), anticorpo primário (Ac) e anti-IgG conjugada coma peroxidase (Ac*). Os melhores resultados foram obtidos nas seguintes condições: 0,14 mgAg/poço, 60 min para o tempo de incubação, diluições de 1:35 e 1:1000 para Ac e Ac*, respecti-vamente. O valor do limiar de reatividade (“cut off”) foi A 450nm = 0,371. O ELISA indireto foiaplicado em amostras de soros de pacientes infectados com doença de Chagas e pacientes comdiferentes doenças sistêmicas. A proteína Tc85-11, a qual está envolvida com a adesão do para-sita na célula hospedeira, é também apropriada para o diagnóstico sorológico da doença deChagas.

Referência(s)