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Internal validation of DNA extraction from human blood reference samples using Chelex 100 resin

2023; Volume: 1; Issue: 52 Linguagem: Português

10.29327/266815.1.52-2

1806-8073

Marlon Anselmo Duarte da Costa, Apoena de Oliveira Lopes, Rafael de Liz, Alexandro Mangueira Lima de Assis, D Silva, Luiz Guilherme Barros Cocentino,

Forensic and Genetic Research

O processo de extração de DNA é uma etapa crucial para o exame de identificação genética. O presente estudo tem por objetivo verificar a eficiência do protocolo de extração por meio da resina Chelex® 100 em amostras de referência de sangue com vistas à obtenção de DNA em quantidade e qualidade suficientes para a genotipagem, sem a necessidade de quantificação prévia. Foram utilizadas amostras de sangue total de 6 (seis) voluntários e, posteriormente, coletados suabes (por meio de imersão em tubo com sangue) para proceder à metodologia de extração por Chelex® 100. Em seguida, os produtos de extração foram quantificados, efetuou-se o cálculo da média e desvio padrão dos valores encontrados e, logo após, realizou-se a amplificação de todos os eluídos com o volume médio obtido no cálculo. Foi analisada a qualidade dos eletroferogramas das amostras amplificadas e calculada a taxa de retrabalho para a amostragem do estudo (razão do número de amostras com necessidade de reamplificação pelo número de amostras totais). Os resultados encontrados demonstraram que a utilização de 1 µL do DNA extraído por Chelex® 100, sem diluição, foi suficiente para a obtenção de perfis genéticos interpretáveis. Por fim, foi possível demonstrar que a etapa experimental da validação da extração de DNA a partir de suabes com sangue de referência por Chelex® 100 encontra-se concluída no Serviço de Perícias em Genética Forense da Polícia Federal, podendo, assim que completada as demais etapas documentais da validação, ser realizada com celeridade e eficiência, uma vez que o DNA obtido apresentou quantidade e qualidade suficientes para ser amplificado e genotipado, de acordo com os requisitos do Laboratório.