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Produção de um anticorpo policlonal anti-Duffy de Bos taurus taurus para detecção e quantificação do antígeno em eritrócitos bovinos

2008; Linguagem: Português

2639-6459

Ana Teresa Burlamaqui Faraco Antonangelo,

Vector-Borne Animal Diseases

viii LISTA DE FIGURAS E TABELAS ix LISTA DE ABREVIATURAS xi 1. INTRODUCAO 15 1.1. Taxonomia dos bovinos 15 1.2. Bovinocultura no Brasil 16 1.2.1. Aspecto economico 16 1.3. Melhoramento genetico na bovinocultura 17 1.4. Babesiose bovina 20 1.5. Antigeno Duffy 22 2.OBJETIVO 28 3. MATERIAIS E METODOS 29 3.1. Obtencao do cDNA do gene Duffy de Bos taurus taurus 29 3.2. Minipreparacao dos Plasmideos 29 3.3. Eletroforese em gel de agarose 30 3.4. Quantificacao do DNA 30 3.5. Reacao em Cadeia da Polimerase (PCR) 30 3.6. Digestao 32 3.6.1. Digestao pCMVSport6/Duffy 32 3.6.2. Digestao do plasmideo de expressao pET28(+) e dos produtos de PCR para clonagem 32 3.6.3. Digestao do plasmideo de expressao pMalc2E e dos produtos de PCR para clonagem 32 3.7. Purificacao de Fragmento de DNA em Gel de Agarose 33 3.8. Ligacao 33 3.9. Preparacao de Celulas Competentes 33 3.10. Transformacao 34 3.11. Preparo de cultura permanente 35 3.12. Sequenciamento dos fragmentos de DNA 35